常用固定液的種類及(色譜分析固定液有哪些分類)

1.色譜分析固定液有哪些分類

一、烴類： 是非極性固定液，包括烷烴和芳烴。

常用的有角鯊?fù)椋ㄏ鄬O性定為零）、石蠟烷和聚乙烯等。 二、硅氧烷類： 是通用型固定液，從弱極性到極性都有，種類多，使用溫度較高，溶解能力強，使用范圍廣。

1、聚二甲基硅氧烷類： 目前使用最廣泛的固定液，可使用溫度范圍大，對一般的有機化合物有較好的溶解能力。 常用的固定液有：SE-30、OV-1、OV-101、SP2100、SF-96、DC-200和UCW982等。

2、聚苯基甲基硅氧烷類： 由于硅原子上引入了苯基，與甲基硅酮相比較，芳香化合物的溶解度升高，極性組分保留值增大。

2.氣液色譜常用的固定液有哪幾類

氣相色譜柱常用的固定液 各類很多，常用的有

一、非極性

1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷，商品名：AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1

二、弱極性

2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基（95%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC5,SE-52,

3、5% Phenyl 1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基（94%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-5,DB-5,SE-54,HP-5,RTX-5,BP-5

注：2、3常無嚴(yán)格區(qū)分，通?；旆Q。

三、中等極性

4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane, 50%二苯基（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-17,HP-50,RTX-50

5、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane, 14%氰丙基苯基（其中7%氰丙基7%苯基）（86%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC10,OV-1701,DB-1701,RTX-1701

6、50% Cyanopropyl phenyl polysiloxane,50%氰丙基苯基（其中25%氰丙基25%苯基）（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC225,OV-225,BP-225,DB-225,HP-225,RTX-225

四、強極性

7、polyethylene glycol，聚乙二醇，商品名：AC20,PEG20M,HP-INNOWAX(FFAP是其與2-硝基對苯二甲酸的反應(yīng)產(chǎn)物)

常用毛細(xì)管色譜柱對應(yīng)表

SE-30、OV-1，化學(xué)組成：100%甲基聚硅氧烷（膠體），所屬極性：非極性，適用范圍：碳?xì)浠衔铩⑥r(nóng)藥、酚、胺，對照牌號：DB-1、BP-1、007-1、SPB-1 、RSL-150、CPSRL-5 、HP-1.

OV-101，化學(xué)組成：100%甲基聚硅氧烷（流體），所屬極性：非極性 ，適用范圍：氨基酸、碳?xì)浠衔?、藥物?，對照牌號：HP-100、SP-2100

SE-52、SE-54，化學(xué)組成：5%苯基聚硅氧烷、1%乙烯基 5%苯基甲基聚硅氧烷 ，所屬極性：弱極性 ，適用范圍：多核芳烴、酚、酯、碳?xì)浠衔?、藥物胺，對照牌號：DB-5 、BP-5、SPB-5、007-2 、OV-73、CPSIL-8、RSL-120 、HP-5.

OV-1701，化學(xué)組成：7%氰丙基、7%苯基甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：藥物、醇、酯、硝基苯類、除莠劑，對照牌號：BP-10、RSL-1701、DB-1701、HP-1701、CPISL-19.

OV-17，化學(xué)組成：50%苯基 50%甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：藥物、農(nóng)藥，對照牌號：DB-17、HP-17、007-17、SP-2250、RSL-300.

OV35，化學(xué)組成：35%苯基 65%二甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性.

OV-225，化學(xué)組成：25%氰丙基、25%苯基、甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：脂肪酸甲脂、碳水化合物、中行固醇，對照牌號：DB-225、HP-225、BP-225、CPSIL-43、RSL-500.

OV-275，化學(xué)組成：100%氰丙基聚硅氧烷，所屬極性：強極性.

XE-60，化學(xué)組成：25%氰乙基、75%二甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：酯、硝基化合物，對照牌號：DB-225、HP-225、CPSIL-43、RSL-500.

FFAP，化學(xué)組成：聚乙二醇硝基苯改性，所屬極性：極性，適用范圍：酸、醇、醛、酯、酮、腈，對照牌號：SP-1000、OV-351、BP-21、HP-FFAP.

PEG-20M，化學(xué)組成：聚乙二醇-20M，所屬極性：極性，適用范圍：酸、醇、醛、酯、甘醇，對照牌號：HP-20M、DB-WAX、007-20M、BP-20.

3.最常用到的幾種組織固定液

(1)中性緩沖甲醛。該液能夠固定大多數(shù)組織結(jié)構(gòu)，對脂類有較好的固定效果。免疫組化、原位雜交等試驗都可以使用。本液還可以長時間存放，是實驗室常備的固定液之一。固定液浸透較慢，固定時間不限，浸透之后可以長時間存放（免疫組化和原位雜交標(biāo)本建議不要這么做）。美中不足是染色時酸性染料著色不佳，并且本液對糖類沒有固定作用。

(2)AAF。該液由醋酸（A）、酒精（A）和甲醛（F）為主要成分，廣泛用于動植物組織的固定和各種實驗檢測，植物固定則是首選。固定液滲透均一，速度很快。固定時間一般為4 ~ 24 h。此液處理后，染色結(jié)果細(xì)膩，但酸性染料著色力下降。本液配制后可以短時間放置。

(3)Bouin。過去常用的一種固定液，主要用于軟化皮膚或者富含結(jié)締組織的標(biāo)本，在胚胎標(biāo)本處理中使用很廣。用本液處理后，酸性染料著色鮮艷。但是，由于含有苦味酸，不能用于原位雜交等實驗檢測。此外，本液對很多細(xì)胞器的破壞較大，尤其不適于固定腎臟標(biāo)本。經(jīng)本液固定的標(biāo)本，尺寸應(yīng)盡可能小，否則內(nèi)外固定的效果有所差別。本液可以較長時間存放，但標(biāo)本在其中不應(yīng)久存，固定8 ~ 24 h為宜。

(4)Zamboni。用于免疫組化和免疫電鏡的首選固定液。保存細(xì)微結(jié)構(gòu)和抗原特性最好的固定液之一。固定液浸透速度較慢，要求標(biāo)本不能過大，常用于血管灌注。該液可以長時間存放，標(biāo)本在其中也可以保存較長時間，抗原封閉作用相對較弱。由于含有苦味酸，故不用于原位雜交試驗。

(5)Helly,Susa,Zenker。這是三種比較相近的固定液，含有汞鹽和重鉻酸鉀。經(jīng)這類固定液處理，標(biāo)本對酸性和堿性染料均有較好的親和能力。染色處理前需要脫汞和脫碘操作。目前除了幾種傳統(tǒng)染色更鮮艷外，并無其他優(yōu)勢。

4.免疫組化實驗中固定液的選擇遵循哪些原則

免疫組化實驗中固定液的選擇是免疫組化成功與否的基礎(chǔ)。

用于免疫組化實驗的固定液種類較多，性能各不一樣。不同抗原，其穩(wěn)定性各不相同，對固定液的耐受性 差異較大。

所以，除要了解不同固定劑的特性外，不同的抗原和標(biāo)本需經(jīng)過反復(fù)試驗，必要時可作多種固定液對比，從而選出理想的固定液。選擇最佳固定液的標(biāo)準(zhǔn) 是：①最好地保持細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；②最大限度地保存抗原的免疫活性。

中性緩沖多聚甲醛（或福爾馬林）液是適應(yīng)性較為廣泛的固定液。值得注意的是免疫 組化實驗中禁用含重金屬的固定液。

5.實驗室常用固液分離的方法及注意事項

最常用的就是過濾，也會用到沉淀后吸取上清夜的方法。

過濾常用的工具有漏斗，在漏斗中放入過濾材料，然后把需要分離的固液混合物倒入漏斗即可。

過濾材料有濾紙、棉花、紗布等，濾紙又分為快速、中速、慢速濾紙。

選用哪種材料過濾取決于實驗對濾夜的澄清度、雜質(zhì)度的要求.必要時，可以多次過濾。

從廢水中除去固體一般采用篩或沉淀方法。污泥處理中采用的分離方法有污泥重力濃縮、污泥的浮選或污泥的機械脫水。水處理中有微濾、澄清和深床過濾等方法。

把固體和液體分開的過程都是固液分離，方法非常多，沉降，過濾，膜過濾，壓濾，真空，離心機。

固液分離機是利用離心力，分離液體中固體顆粒物和絮狀物的機械。

6.固定液的選擇原則

根據(jù)被分離組分和固定液分子間的相互作用關(guān)系，固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”，即固定液的性質(zhì)與被分 離組分之間的某些相似性，如官能團(tuán)、化學(xué)鍵、極性、某些化學(xué)性質(zhì)等，性質(zhì)相似時，兩種分子間的作用力就強，被分離組分在固定液中的溶解度就大，分配系數(shù) 大，因而保留時間就長；反之溶解度小，分配系數(shù)小，因而能很快流出色譜柱。

下面就不同情況進(jìn)行討論：

a、分離極性化合物，采用極性固定液。這時樣品各組分與固定液分子間作用力主要是定向力和誘導(dǎo)力，各組分出峰次序按極性順序，極性小的先出峰，極性越大， 出峰越慢；

b、分離非極性化合物，應(yīng)用非極性固定液，樣品各組分與固定液分子間作用力是色散力，沒有特殊選擇性，這時各組分按沸點順序出峰，沸點低的先出峰。對于沸 點相近的異構(gòu)物的分離，效率很低；

c、分離非極性和極性化合物的混合物時，可用極性固定液，這時非極性組分先餾出，固定液極性越強，非極性組分越易流出；

d、對于能形成氫鍵的樣品。如醇、酚、胺和水的分離，一般選擇極性或氫鍵型的固定液，這時依組分和固定液分子間形成氫鍵能力大小進(jìn)行分離?！跋嗨葡嗳菪栽?則”是選擇固定液的一般原則，有時利用現(xiàn)有的固定液不能達(dá)到滿意的分離結(jié)果時，往往采用“混合固定液”，應(yīng)用兩種或兩種以上性質(zhì)各不相同的，按適合比例混 合的固定液，使分離有比較滿意的選擇性，又不致使分析時間延長。然而，在實際工作中選擇固定液往往是參考資料或文獻(xiàn)介紹的實例來選用固定液的。