evg染色(血涂片的血涂片)
1.血涂片的血涂片
1） 玻片的清洗：新玻片常有游離堿質(zhì)，因此應用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時，然后再徹底清洗。用過的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20分鐘，再用熱水將肥皂和血膜洗去，用自來水反復沖洗，必要時再置95%乙醇中浸泡1小時，然后擦干或烤干備用。使用玻片時只能手持玻片邊緣，切勿觸及玻片表面；，以保持玻片清潔，干燥，中性、無油膩。
2） 細胞染色對氫離子濃度十分敏感，在染色過程中玻片必須化學清潔，配制瑞氏染液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇，稀釋染液必須用緩沖液，沖洗用水應近中性，否則各種細胞染色反應異常，致使細胞的識別困難，甚至造成錯誤。
3） 一張良好的血片，要求厚薄適宜，頭體尾分明，分布均勻，邊緣整齊，兩側(cè)留有空隙。血片制好后最好立即固定染色，以免細胞溶解和發(fā)生退行性變。
4） 血膜未干透，細胞尚未牢固附在玻片上，在染色過程中容易脫落，因此血膜必需充分干燥.
5） 染色時間與染液濃度，室溫高低，細胞多少有關(guān).染液越淡，室溫越低，細胞越多，所需染色時間越長或應適當增加染液量，因此染色時間應視具體情況而定.特別是更換新染料時必須經(jīng)試染，摸索最佳染色條件.
6） 染液不可過少，以防蒸發(fā)干燥染料沉著于血片上難沖洗干凈.
7） 沖洗時應用流水將染液沖去.不能先倒掉染液，以免染料沉著于血片上.
8） 染色過深可用甲醇或酒精適當脫色，最好不復染，必須復染時，可將染液先稀釋好再復染.
9） 染色時應注意保護血膜尾部細胞，不能劃掉.因為體積較大細胞常在此處出現(xiàn).
2.如何給鹿角染色
植鞣革染色的效果，因染料不同、手法不同、使用時間、保養(yǎng)方法不同而異。
【酒精染料】是最便宜易得的手工皮革染料。優(yōu)點是水溶性，可以隨意混合調(diào)色（盡量同品牌內(nèi)），可加水稀釋調(diào)節(jié)顏色深淺，顏色選擇比較多，使用方法比較隨意：擦染、浸染、噴染都可以。
缺點是染后會使皮革變得干硬，需要額外補充油脂。這里重點說液體油染。
雖然用液體油性染料手工染色的話很難染得非常均勻沒有色差，但那種有深有淺的斑駁感覺非常適合表現(xiàn)手工制品質(zhì)樸又富于變化的氣質(zhì)。有天然砂石磨碎的，有經(jīng)上色再燒結(jié)的，正規(guī)加工的染色劑是無毒害的。
一般，裝飾用彩砂經(jīng)過精選加工而成，不含任何染料，具有無毒、無味、無污染、抗腐蝕、耐酸堿、抗暴曬、不變色等特點。只要是購買正規(guī)廠家的合格產(chǎn)品都沒有毒害。
在被染色的區(qū)域擦上風油精慢慢揉開就好了。注意這樣處理完之后，用洗潔精或者牙膏再洗一下，建議不要用刷子刷，稍微洗洗就好了。
處理后的包包用毛巾擦干表面上的水分，然后有條件最好是再擦點那種皮具專門用的保護液之類的，因為用完風油精之后其實能夠明顯的感覺到那塊區(qū)域沒有以前那么亮了，可能是清潔過度。用漂洗液！超市里很多賣的，產(chǎn)品包裝上有使用說明！一般泡在混合漂洗液的水里面20分鐘在用普通洗衣粉洗洗就OK了！彩漂液貴不如白漂液效果好。
3.ATP酶染色的具體步驟與注意事項?我最近要做肌肉組織切片的ATP
你所描述的問題很可能是溶液的pH值的問題，染色的結(jié)果與pH密切相關(guān)，附區(qū)分骨骼肌纖維類型的ATP酶組織化學方法： 顯示肌球蛋白的ATP，肌纖維I、II型。
1。 組織固定于10%~15%中性福爾馬林。
2。 水洗后入0。
88庶糖水溶液，或1%阿拉伯膠（100ml加30g庶糖）浸2~3d。 3。
冰凍切片10um，分別放入三種不同PH值的預孵育液內(nèi)，室溫下10min。PH分別為10。
4、4。65和4。
3（準確）。 4。
入巴比妥鈉液（PH9。4）1min。
5。 入孵育液30min,37℃。
6。 2%氯化鈷（用前配制）3min 7。
蒸餾水洗3次1min/次 8。 1%硫化胺（用時配制）10min 9。
流水沖洗不少于10min。 10。
各級酒精脫水、透明、封片。 預孵育液： 1。
巴比妥鈉PH10。4，取巴比妥鈉4。
12g，氯化鈉1。998g，加蒸餾水1000ml。
2。 醋酸緩沖液PH4。
65,A液：醋酸鈉13。5g加蒸餾水至500ml。
B液：冰醋酸6ml蒸餾水至500ml。 取A液24ml,B液26ml混合至PH4。
65。 3。
醋酸緩沖液PH4。3。
用2液調(diào)PH至4。3。
孵育液： 取巴比妥鈉液（PH9。4）10ml加三磷酸腺甘鈉鹽20mg。
結(jié)果： PH值 纖 維 類 型 I IIA IIB IIC 10。 4 灰或白 黑 黑 黑 4。
65 黑 白 灰或黑 黑 4。3 黑 白 白或灰 深灰 ----------------------------------------------- 巴比妥鈉能影響Ca2+-ATPase活性，對實驗最后一步硫化胺沉淀顯色很重要。
另外，蔗糖溶液是為了保持更好的滲透壓，讓細胞原始形狀保持更好，PBS應該不如蔗糖好。
4.免疫組化實驗染色的注意事項及影響因素有哪些
免疫組化染色影響因素
影響免疫組化染色質(zhì)量的因素有很多，在實驗中應注意組織的取材和固定，選擇質(zhì)量好的商品化抗體，恰當?shù)剡x擇和使用封閉和抗原修復手段，嚴格的技術(shù)操作和對照等。
1。假陰性反應可發(fā)生在：
1） 組織內(nèi)待測抗原已被分解破壞，或抗原含量過低；
2） 抗原被遮蓋，多由于醛類固定劑的使用，使組織中的大分子蛋白借醛鍵形成交聯(lián)而遮蓋待檢抗原；
3） 抗體質(zhì)量不佳或稀釋度不當；
4） 技術(shù)操作失誤等。
2.假陽性反應可發(fā)生在：
1） 抗體與非待檢抗原發(fā)生交叉反應，在使用多克隆抗體時易出現(xiàn)；
2） 組織對抗體的非特異性吸附，特別是在有大片組織壞死或組織中有較多富于蛋白的液體時容易發(fā)生；
3） 內(nèi)源性過氧化酶的作用，在脾臟、骨髓及一些炎性病變組織的染色中易出現(xiàn)；內(nèi)源性堿性磷酸酶的作用，特別是腸黏膜上皮和腎近曲小管的刷狀緣有高濃度的堿性磷酸酶，若處理不徹底，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
4） 判斷失誤，將腫瘤組織中殘留的正常組織的免疫組織化學陽性信號誤認為是腫瘤的染色反應；
5） 當腫瘤浸潤破壞正常組織時，使被破壞的正常細胞胞漿內(nèi)的可溶性蛋白釋放，后者被腫瘤細胞非特異吸附或吞噬，使瘤細胞出現(xiàn)該種抗原的陽性反應；⑥外源性和內(nèi)源性色素的干擾。
5.簡單染色發(fā)中各種步驟的注意事項是什么
革蘭染色過程所用四種不同溶液和作用： 1、堿性染料：這在簡單染色中已討論過，此處用結(jié)晶紫. 2、媒染劑：其作用是增強染料與細菌的親和力，更好地加強染料與細胞的結(jié)合.常用的媒染劑是碘液. 3、脫色劑：幫助染料從被染色的細胞中脫色.利用細菌對染料脫色的難易程度不同，而將細菌加以區(qū)分.革蘭陽性細菌不易被脫色劑脫色，而革蘭陰性細菌則易被脫色.常用的脫色劑是丙酮或乙醇，這里所用的是95%的乙醇. 4、復染液：也是一種堿性染料，目的是使脫色的細菌重新染上另一種顏色，以便與未脫色菌進行比較.這里用的是蕃紅花紅溶液. 革蘭染色的實驗步驟 1.涂片：左手持菌液試管，右手持接種環(huán)，用接種環(huán)從試管培養(yǎng)液中取一環(huán)菌，于載玻片中央涂成薄層（事先在背面做好標記圓圈）即可，或先滴一小滴無菌水于載玻片中央，用接種環(huán)從斜面上挑出少許，與載玻片上的水滴混合均勻，涂成一薄層. 拔或塞試管塞時，應將試管口通過火焰略加燒灼，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌. 2.干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥，但勿靠近火焰. 3.固定：常用高溫進行固定.即手持載玻片一端，標本面朝上，在燈的火焰外側(cè)快速來回移動3~4次，共約3~4秒.要求玻片溫度不超過60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜，放置待冷后染色. 固定的目的是： ① 殺死微生物，固定其細胞結(jié)構(gòu)； ② 保證菌體能牢固地粘附在載玻片上，以免水洗時被水沖掉； ③ 改變菌體對染料的通透性，一般死細胞原生質(zhì)容易著色. 4.染色：將固定好的涂片放于報紙上，每次滴加一滴染液進行染色. 注意：乙醇脫色時滴加乙醇至流出液為無色立即進行水洗； 蕃紅復染由于時間較長，應在染液干燥前補加染液； 鏡檢時吸水注意不要擦標本. 革蘭染色的實驗現(xiàn)象 如果將細菌做革蘭染色，凡染后菌體呈藍紫色的，稱為“革蘭陽性菌”；菌體是伊紅色，稱“革蘭陰性菌”.無論陽性菌還是陰性菌，都有桿菌和球菌.葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌是臨床最為常見的病原菌，葡萄球菌屬于革蘭陽性菌，大腸桿菌屬于革蘭陰性菌中的腸桿菌科，除大腸桿菌以外，臨床較常見的腸桿菌科細菌還有變形桿菌屬，沙門菌屬、克霉白菌屬；銅綠假單胞菌是臨床常見的較耐藥革蘭陰性桿菌.。
6.革蘭氏染色的注意事項
用途：用于細菌革蘭氏染色實驗
成分：
結(jié)晶紫染色液（每瓶）：
結(jié)晶紫 0. 1g
95%乙醇 2mL
1%草酸銨水溶液 8mL
革蘭氏碘液（每瓶）：
碘 0.033g
碘化鉀 0.067g
蒸餾水 10mL
脫色酒精（每瓶）：
95%酒精 10mL
沙黃復染液（每瓶）：
沙黃 0.025g
95%乙醇 1mL
蒸餾水 9mL
使用方法：
1.將涂片在火焰上固定，滴加結(jié)晶紫染色液。染1min，水洗。
2.用空瓶裝所需的革蘭氏碘液，臨用時滴加革蘭氏碘液，作用1min。水洗。。用剩碘液應及時再裝回棕色玻璃瓶中。
3.滴加脫色酒精，約30s；或?qū)⒚撋凭螡M整個涂片，立即傾去，再用95%酒精滴滿整個
涂片，脫色10s。
4.水洗，滴加沙黃復染液，復染1min，水洗，待干，鏡檢。
結(jié)果：
革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。
貯存：常溫避光（可放回原包裝盒）
規(guī)格：10ml*4瓶/盒
7.普通光學顯微鏡的使用及細菌的簡單染色法實驗的注意事項有哪些
由于細菌體積小且透明，在活體細胞內(nèi)又含有大量的水分，因此，對光線的吸收和反射與水溶液相差不大。
當把細菌懸浮在水滴內(nèi)，放在顯微鏡下觀察時，由于與周圍背景沒有顯著的明暗差，難于看清它們的形狀，更談不上識別其細微結(jié)構(gòu)。而經(jīng)過染色，就可借助顏色的反襯作用比較清楚地看到菌體形態(tài)，亦即菌體表面及內(nèi)部結(jié)構(gòu)著色與背景形成鮮明對比，這樣便可在下清晰地觀察到微生物的形狀和結(jié)構(gòu)，而且還可以通過不同的染色反應來鑒別微生物的類型和區(qū)分死、活細菌等，因此，染色技術(shù)是觀察細菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的重要手段。
