測量藥材含量的方法(高效液相色譜法測定中藥含量采用的方法)

1.高效液相色譜法測定中藥含量采用的方法有哪些

遵照下面的要求選擇合適的方法，HPLC法外標、內(nèi)標兩種，檢測器一般UV即可。

含量測定分析方法驗證的可接受標準簡介

摘要：本文介紹了在對含量測定所用的分析方法進行方法學驗證時，各項指標的可接受標準，以利于判斷該分析方法的可行性。

關鍵詞：含量測定 分析方法驗證 可接收標準

在進行質量研究的過程中，一項重要的工作就是要對質量標準中所涉及到的分析方法進行方法學驗證，以保證所用的分析方法確實能夠用于在研藥品的質量控制。為規(guī)范對各種分析方法的驗證要求，我國已于2005年頒布了分析方法驗證的指導原則。該指導原則對需要驗證的分析方法及驗證的具體指標做了比較詳細的闡述。但是文中未涉及各具體指標在驗證時的可接受標準，國際上已頒布的指導原則中也未發(fā)現(xiàn)相關的要求。另一方面，大多數(shù)藥品研發(fā)單位在進行質量研究時，已逐步認識到分析方法驗證的必要性與重要性，大都也在按照指導原則的要求進行分析方法驗證，但驗證完后卻因沒有一個明確的可接受標準，而難以判斷該分析方法是否符合要求。本文結合國外一些大型藥品研發(fā)企業(yè)在此方面的要求，提出了在對含量測定方法進行驗證時的可接受標準，供國內(nèi)的藥品研發(fā)單位在進行研究時參考。

1.準確度

該指標主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求分別配制濃度為80%、100%和120%的供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。

可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應在98.0%-102.0%之間，9個回收率數(shù)據(jù)的相對標準差（RSD）應不大于2.0%。

2.線性

線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：

在80%至120%的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算相應的含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析。

可接受的標準為：回歸線的相關系數(shù)（R）不得小于0.998,Y軸截距應在100%響應值的2%以內(nèi)，響應因子的相對標準差應不大于2.0%。

3.精密度

1）重復性

配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標準差應不大于2.0%。

2）中間精密度

配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數(shù)據(jù)的相對標準差應不大于2.0%。

4.專屬性

可接受的標準為：空白對照應無干擾，主成分與各有關物質應能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測器進行純度分析時，主峰的純度因子應大于980。

5.檢測限

主峰與噪音峰信號的強度比應不得小于3。

6.定量限

主峰與噪音峰信號的強度比應不得小于10。另外，配制6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液主峰的保留時間的相對標準差應不大于2.0%。

7.耐用性

分別考察流動相比例變化±5%、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20%時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次?？山邮艿臉藴蕿椋褐鞣宓耐衔惨蜃硬坏么笥?.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標準差應不大于2.0%。

8、系統(tǒng)適應性

配制6份相同濃度的供試品溶液進行分析，主峰峰面積的相對標準差應不大于2.0%，主峰保留時間的相對標準差應不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離，主峰的理論塔板數(shù)應符合質量標準的規(guī)定。

2.中藥制劑分析用于總成分的含量測定方法有哪些

中藥制劑分析用于總成分的含量測定方法有：

1、化學分析法： 包括重量分析法和滴定分析法， 可以測定： 總生物堿、總有機酸、總皂苷及礦物藥成分等。

2、分光光度法： 用于總皂苷、總生物堿、總黃酮的測定。

滴定分析

根據(jù)滴定所消耗標準溶液的濃度和體積以及被測物質與標準溶液所進行的化學反應計量關系，求出被測物質的含量，這種方法被稱為滴定分析法。

擴展資料

試劑等級

一級品 即優(yōu)級純

1、一級品 即優(yōu)級純，又稱保證試劑（符號G.R.），我國產(chǎn)品用綠色標簽作為標志，這種試劑純度很高，適用于精密分析，亦可作基準物質用。

二級品 即分析純

2、二級品 即分析純，又稱分析試劑（符號A.R.），我國產(chǎn)品用紅色標簽作為標志，純度較一級品略差，適用于多數(shù)分析，如配制滴定液，用于鑒別及雜質檢查等。

三級品 即化學純

3、三級品 即化學純，（符號C.P.），我國產(chǎn)品用藍色標簽作為標志，純度較二級品相差較多，適用于工礦日常生產(chǎn)分析。

四級品 即實驗試劑

4、四級品 即實驗試劑（符號L.R.），雜質含量較高，純度較低，在分析工作常用輔助試劑（如發(fā)生或吸收氣體，配制洗液等）。

基準試劑

5、基準試劑 它的純度相當于或高于保證試劑，通常專用作容量分析的基準物質。稱取一定量基準試劑稀釋至一定體積，一般可直接得到滴定液，不需標定，基準品如標有實際含量，計算時應加以校正。

光譜純試劑

6、光譜純試劑（符號S.P.） 雜質用光譜分析法測不出或雜質含量低于某一限度，這種試劑主要用于光譜分析中。

7、色譜純試劑 用于色譜分析。

8、生物試劑用于某些生物實驗中。

9、超純試劑 又稱高純試劑。

參考資料來源：百度百科-化學分析法

3.藥物中測定某物質含量的常用方法有那些

方法的驗證： 訂入質量標準的含量測定法不同于一般質量考察的方法，須經(jīng)過嚴格的方法學驗證，不同原理的測定法具有不同的驗證內(nèi)容及要求：

(1)容量分析法的驗證：①精密度：用原料藥精制品考察方法精密度，平行試驗5個樣本的RSD≤0.2%；②準確度：以測定原料精制品（含量>99.5%）的回收率（測定值與理論值的比值）計算，應在99.7%~100.3%之間（n=5,RSD≤0.1%）；③滴定終點確定的依據(jù)：包括滴定曲線的繪制，如用指示劑法確定終點，應用電位法校準終點顏色，提供指示劑顏色與電位變化情況的對比結果；④耐用性：考察測定條件（供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間等）有微小變動時，測定結果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應在方法中注明。

(2)HPLC法的驗證：①精密度：RSD≤2%(n=5)；②準確度：用于制劑時，要考察輔料的影響，將一定量藥物加到按處方比例配制的輔料中（為標示量的80%~120%）制成高、中、低三個劑量，混合均勻后，每個劑量取三份樣品，按擬定方法測定回收率，應在98%~102%之間（n=9, RSD≤2%）。③線性范圍：用已知含量的精制品配制一系列濃度的溶液（n=5~7），用濃度C對峰面積A或峰高h或被測物的響應值之比進行回歸處理，線性方程的相關系數(shù)r≥0.999，截距應趨于零，并提供線性關系圖；④專屬性：輔料、有關物質或降解產(chǎn)物峰對主藥峰應無干擾；⑤耐用性：考察測定條件（供試液穩(wěn)定性、流動相組成和pH值、不同品牌或批號的同類色譜柱、柱溫、流速、樣品提取次數(shù)、時間等）有微小變動時，測定結果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應在方法中注明；⑥靈敏度：作為常量分析法，此項可不作主要要求。

(3)UV法的驗證：①精密度：RSD≤1%(n=5)；②準確度：方法同HPLC法，回收率應在98%~102%之間（n=9, RSD≤2%），同時要求輔料、有關物質或降解產(chǎn)物在測定波長處無吸收。③線性范圍：用已知含量的精制品配制一系列濃度的溶液（n=5~7，吸收度A在0.2~0.7間），用濃度C對峰面積A或峰高h或被測物的響應值之比進行回歸處理，線性方程的相關系數(shù)r應≥0.999，截距應趨于零，并提供線性關系圖；④耐用性：考察測定條件（供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間、比色法中顯色劑用量、反應溫度、時間、pH值等）有微小變動時，測定結果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應在方法中注明；⑤靈敏度：作為常量分析法，此項可不作主要要求。

吸收度A在0.2~0.8間其線形關系好，利用標準品建立標準曲線后，受測溶液做適當?shù)南♂?，使其吸收度?.2~0.8，如果太小或太大，都將影響測定的準確性的。

4.中草藥中生物堿含量測定方法有哪些

中草藥中生物堿的含量測定一般包括三個步驟——提取、分離精制與含量測定。

現(xiàn)將常用方法筒述如下： 1。提?。?稱取一定量的藥材，根據(jù)生物堿的溶解性能堿化后用有機溶劑提取或用酸水或用乙醇提取得游離生物堿或其鹽類。

提取方法用冷浸法、滲漉法、口流提取法、離子交換法均可。 2。

分離精制： 多用溶劑法。利用生物堿在酸水中成鹽，不溶于有機溶劑，堿化后游離易溶于有機溶劑的性質，反復于分液漏斗中萃取精制。

有時亦可加某些試劑使雜質沉淀而除去或用氧化鋁柱層析法去除雜質。 3。

含量測定： 以容量法應用最多，亦可用重量法、比色法、可見光與紫外光分光光度法、層析法等。 容量法中又以酸堿滴定法較簡便常用。

即將用上述方法提取精制所得之生物堿溶于過量標準酸溶液中，用標準堿液回滴，從消耗的酸量算出生物堿的含量。 如果中草藥中所含生物堿不止一種，則測得的為總生物堿含量，而以其中主要生物堿為代表計算的近似值。

如需準確地測定某一生物堿的含量，則應分離得個別生物堿后再行測定。

5.中藥材的鑒定方法主要包括哪幾種

1、看藥材的表面。不同種類的藥材由于用藥部位的不同，其外形特征會有所差異。如根類藥材多為圓柱形或紡錘形，而根莖類藥材都有較多的莖痕，皮類藥材則多為卷筒狀，等等。另外，一些藥材有著它們自己特定的表面特征，或光華、或粗糙、或長有鱗葉、皮孔、茸毛和突起等。比如海馬的外形就被總結成為“馬頭蛇尾瓦楞身”，羚羊角長有“通天眼”，防風長有“蚯蚓頭”等。這些特征都是鑒別道地藥材真?zhèn)蝺?yōu)劣的重要依據(jù)。

2、看顏色。藥材顏色的不同或變化，不僅與它的品種和本身的質量有關，不適當?shù)募庸ず蛢Σ胤椒ㄒ矔苯佑绊懰幉牡纳珴?，因此顏色是鑒別藥材的重要因素。我們可以通過對藥材外表顏色的觀察，分辨出藥材的品種、產(chǎn)地和質量的好壞。比如，黃連色要黃，丹參色要紅，玄參色偏黑等。

3、看斷面。無論植物也好，動物也好，都是由一層層的組織器官構造而成的，當藥材被切開，這一層層的構造就會清晰地展現(xiàn)出來，就像古樹的年輪一樣。很多藥材的斷面都具有明顯的特征，而這些特征就是藥材內(nèi)部構造的直接體現(xiàn)。我們可以清楚的看見各種分層、紋路和不同形狀的小點。比如在防己斷面上能看見明顯的車輪紋理，而黃芪的折斷面紋理呈“菊花心”樣，杜仲在折斷時更有膠狀的細絲相連，等等。這些獨有的斷面特征是鑒別藥材的重要依據(jù)。

用手感受藥材的軟硬、輕重，疏松還是致密，光滑還是粘膩，細致還是粗糙，以此鑒別藥材的好壞。不同藥材的質感是不一樣的，即使是同一種藥材，由于加工炮制的方法不同，也會有較大的差異。如荊三棱堅實體重，而泡三棱則體輕；鹽附子質軟，而黑附子則質地堅硬。

三、口嘗和鼻聞。

藥材的氣味與其所含的成分有關，鼻聞是比較重要的鑒別方法，尤其對于鑒別一些有濃郁氣味的藥材是很有效的，如薄荷的香、魚腥草的腥、阿魏的臭等等?？趪L法鑒別藥材的意義不僅在于味道還包括“味感”，味分為辛、甘、酸、苦、咸五味，如山楂的酸、黃連的苦、甘草的甜等。味感則分為麻、澀、淡、滑、涼、膩等。藥材的味感和所含的化學物質也有密切關系，在中藥材口嘗鑒別的實踐中，可按藥材的品種和質量分類進行判斷。

四、水試和火試。

有些藥材放在水中，或用火燒灼一下會產(chǎn)生特殊的現(xiàn)象。如熊膽的粉末放在水中，會先在水面上旋轉，然后成黃線下沉而不會擴散。麝香被燒灼時，會產(chǎn)生濃郁的香氣，燃盡后留下白色的灰末。這些特殊的現(xiàn)象都與藥材內(nèi)所含的化學成分有密切的關系，是常用的鑒別方法。