測定維生素c還方法(測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍)
1.測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍
維生素C不同的測定方法 目前研究維生素C測定方法的報道較多，有關維生素C的測定方法如熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發(fā)光法、電化學分析法及色譜法等，各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果. 為了解國內(nèi)VC含量測定方法及其應用方面的現(xiàn)狀及發(fā)展態(tài)勢.方法以"維生素C或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994~2002年中國期刊網(wǎng)全文數(shù)據(jù)庫（CNKI）中的理工A、B和醫(yī)藥衛(wèi)生專輯進行篇名檢索，對所得有關維生素C含量測定的文獻數(shù)據(jù)分別以年代、作者區(qū)域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06%，其中光度法占65.69%，電化法占18.63%，色譜法占12.75%；復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06%，其中光度法占60.92%，色譜法占19.54%，電化法占10.34%.結論目前國內(nèi)維生素C含量測定仍以光度法為主流，但近年來色譜法，特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯. 一.熒光法 1.原理 樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸后，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline），其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。
脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產(chǎn)生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022 g/ml。
2.適用范圍 本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測定 3. 注意事項 3.1 大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應采用新鮮樣品并盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品制成勻漿以保存維生C。 3.2 某些果膠含量高的樣品不易過濾，可采用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。
3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與準確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。
二、2,6-二氯靛酚滴定法（還原型VC） 1、原理： 還原型抗壞血酸還原染料2,6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6-二氯靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。
在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標準2,6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用于測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2,4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。
2、注意事項 ⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水； ⑵ 滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考； ⑶ 樣品進入實驗室后，應浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C； ⑷ 貯存過久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。
這時如用草酸，低鐵離子可以還原2,6-二氯靛酚，使測定數(shù)字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發(fā)生； ⑸ 整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化； ⑹ 在處理各種樣品時，如遇有泡沫產(chǎn)生，可加入數(shù)滴辛醇消除； ⑺ 測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。 3優(yōu)點：它具有簡便、快速、比較準確等優(yōu)點，適用于許多不同類型樣品的分析。
缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾。如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。
在酸性環(huán)境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或堿性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。
因此，當用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP 便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化。依據(jù)滴定時2,6—DCIP 標準溶液的消耗量 （ml），可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。
氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應。即先將樣品溶于一定濃度的酸性溶液中或經(jīng)抽提后，再用2,6—DCIP標準溶液滴定至終點。
食物和生物材料中常含有其他還原物質，其中有些還原物質可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸后，再用2,6—DCIP 滴定樣品中其他還原物質。
然后從滴定未經(jīng)酶處理樣品時2,6—DCIP標準溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質2,6—DCIP 標準溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2,6—DCIP標準溶液的體積，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2,6—DCIP反應速度的差別，并通過控制樣品溶液在pH1 — 3 范圍內(nèi)，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質與2,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制。
生物體液（如血液、尿等）中的。
2.維生素C的測定方法有哪些,各有何優(yōu)缺點,請加以對比,最好能列表
2.6一二氯酚靛酚滴定法測定還原型抗壞血酸是多年采用的經(jīng)典方法。該法簡便易行、快速，目前仍被廣泛運用。但此方法尚存著一定均缺點，突出的一點是滴定終點難以確定。利用2.6一二氯酚靛酚滴定含有抗壞血酸的酸性物質溶液而當抗壞血酸尚未被全部被氧化時，滴下的2.6一二氮酚靛酚立即被還原成無色。而溶液中的坑壞血酸一旦被氧化，則滴入的2.6一二氮酚靛酚則立即使溶液呈現(xiàn)紅色。所以，當溶液從無色轉變成微紅色時，即表示溶液中的抗壞血酸剛剛
被全部氧化，此時為滴定終點。此種方法對于無色或淡黃色、綠色樣品液的滴定終點易確定，而對于山植、大棗、草葺、酸棗等紫色、粉紅或褐色等色澤的朵蔬樣品液的滴定終點就難以觀察確定。為此，往往經(jīng)稀釋，添加活性炭、白陶土來進行脫色處理，添加維生素C的方法來解決。既使如此，仍難得到滿意的結果，測定數(shù)據(jù)也很難準確。為克服以上缺點，近年來經(jīng)反復多次的實驗研究，采用2.6一二氯酚靛酚反滴定法測果蔬中還原抗壞血酸，終于摸索出比較合理的實
驗條件，收到了比較滿意的效果。
3.水果中維生素c含量的測定方法有幾種
水果中維生素c含量的測定方法有三種，分別為原子吸收分光光度法、紫外可見分光光度法、高效液相色譜法。
1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問接測定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發(fā)生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。
2、紫外-可見分光光度法
利用紫外-可見分光光度法測定維生素C的含量是基于維生素c在紫外光區(qū)有特征吸收，但是因為維生素C結構中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩(wěn)定存在，直接測定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測定時，維生素標準溶液和待測樣的配制條件非常重要。
3、高效液相色譜法
高效液相色譜法是以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將維生素C的溶劑裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而測量出維生素c的含量。
擴展資料
維生素c含量的測定方法對比：
由于維生素C自身的不穩(wěn)定，導致了很多方法測定結果誤差較大，所以對維生素C穩(wěn)定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因為測定較準確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發(fā)展前景，是目前發(fā)展較快的一種方法。
參考資料來源：百度百科-維生素c
百度百科-高效液相色譜
百度百科-原子吸收分光光度法
百度百科-紫外-可見分光光度法
4.蔬菜中維生素c的測定方法有哪些
取4g新鮮的土豆用刀切碎，再用研磨研磨成像土豆泥的樣子。
2
用5ml2%草酸加到研缽中進行溶解，并用50ml容量瓶進行定容。
3
定容后上下?lián)u晃，以使溶劑溶解充分，并用漏斗的濾紙析出純凈的濾液。
4
取析出的濾液進行滴定，共取30ml。分三次，每次10ml。最后取平均值。滴定終點是出現(xiàn)粉紅并且15s內(nèi)不褪色即可。記錄下每次滴定所用的2,6-二氯酚靛酚溶液的體積。
5
實驗結束后，所滴定的溶液的顏色，為粉紅色。
END
2,6-二氯酚靛酚的標定（測出公式中的K值）
分別取5ml標準的維生素 C（里加5ml1%的草酸），和5ml,1%的草酸進行滴定。
用2,6-二氯酚靛酚進行的標定，兩瓶都進行三次，最后取平均值。
END
注意事項
計算公式： 1.根據(jù)滴定前后的物質的量（n）不變，可以得出CV=cv，化簡可得到，1ml2,6-二氯酚靛酚的標定所對應的維生素的含量，這樣已知2,6-二氯酚靛酚的標定，就知道維生素的的含量了，然后除以提取的樣品比，救治總樣品含多少了。
分步解釋：第一步，已測出樣品中含草酸的維生素和草酸得含量，是用2,6-二氯酚靛酚的標定體積表示的，轉化成樣品的維生素C的含量。第二步，實驗二已測出K值，（質量乘體積的比是相等的，參看注意事項一說的）。然后用其和總質量乘體積的比，算出維生素C的含量，轉化為百分數(shù)。
5.維生素C的測量方法（滴定）有哪幾種
蔬菜中維生素C的測量
用品：試管、研缽、紗布、西紅柿、黃瓜、淀粉碘酒溶液、氫氧化鈉溶液。
原理：維生素C又叫抗壞血酸，它的第2、3碳位的烯醇結構具有很強的還原性，能把碘原子還原成碘離子，使原來淀粉遇碘所顯示的藍色自行褪去。維生素C在受熱及堿性條件下，易分解破壞。
操作：
1.制備汁液：取新鮮西紅柿、黃瓜各100g，洗凈后在研缽中搗爛，用紗布包住擠出汁液待用。
2.取上述制出的汁液各1mL，分盛兩支試管中，各加6滴淀粉碘酒溶液，發(fā)現(xiàn)顏色變化是：西紅柿汁中藍色褪，黃瓜汁中還有較淺的藍色。
3.取由1制出的汁液各1mL，加熱至沸，并保持沸騰約15min，然后加入淀粉碘酒溶液各6滴，發(fā)現(xiàn)藍色基本保持不變。
4.取由1制出的汁液各1mL，各加氫氧化鈉溶液各6滴，振蕩均勻后，各加淀粉碘酒溶液各6滴，發(fā)現(xiàn)藍色基本保持不變。
結論：
1.蔬菜中維生素C的含量，是依據(jù)相同實驗條件下藍色的褪色程度來確定，藍色深則含量低，藍色愈淺則含量愈高。
2.蔬菜燒煮時間不能過長，也不能加堿，否則維生素C被破壞。
6.測量維生素C時應注意哪些操作步驟
在測定維生素C的國標方法中，熒光法為測定食物中維生素C含量的第一標準方法，2、4-二硝基苯肼法作為第二法。
熒光法操作注意事項：
1大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應采用新鮮樣品并盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品制成勻漿以保存維生素C。
2 某些果膠含量高的樣品不易過濾，可采用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。
3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與準確，所以，應用天平稱量。實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。
2、4-二硝基苯肼法操作注意事項：
1大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應采用新鮮樣品并盡快用2%草酸溶液制成勻漿以保存維生素C。
2 若溶液中含有糖，硫酸加得太快，溶解熱會使溶液變黑。
3 試管自冰水中取出后，顏色會繼續(xù)變深，所以，加入硫酸后30分鐘應準時比色。
