免疫缺陷檢查方法(免疫學(xué)的檢測(cè)方法)

1.免疫學(xué)的檢測(cè)方法有哪些

免疫學(xué)檢測(cè)方法可分為體液免疫和細(xì)胞免疫。

體液免疫：

所謂體液免疫，即以B細(xì)胞產(chǎn)生抗體來(lái)達(dá)到保護(hù)目的的免疫機(jī)制。負(fù)責(zé)體液免疫的細(xì)胞是B細(xì)胞。體液免疫的抗原多為相對(duì)分子質(zhì)量在10,000以上的蛋白質(zhì)和多糖大分子，病毒顆粒和細(xì)菌表面都帶有不同的抗原，所以都能引起體液免疫。

臨床上一個(gè)反復(fù)發(fā)作的化膿感染，常使醫(yī)生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原發(fā)免疫缺陷發(fā)病年齡很小，而繼發(fā)免疫缺陷病人多在30歲以上。絕大多數(shù)免疫缺陷病人多表現(xiàn)為體液和細(xì)胞免疫同時(shí)受損，所以應(yīng)全面檢查這兩方面的功能。遺憾的是，目前應(yīng)用的檢測(cè)方法的局限性，其結(jié)果常難以得出明確結(jié)論。

細(xì)胞免疫：

T細(xì)胞受到抗原刺激后，增殖、分化、轉(zhuǎn)化為致敏T細(xì)胞（也叫效應(yīng)T細(xì)胞），當(dāng)相同抗原再次進(jìn)入機(jī)體的細(xì)胞中時(shí)，致敏T細(xì)胞（效應(yīng)T細(xì)胞）對(duì)抗原的直接殺傷作用及致敏T細(xì)胞所釋放的細(xì)胞因子的協(xié)同殺傷作用，統(tǒng)稱為細(xì)胞免疫。

在抗感染免疫中，細(xì)胞免疫主要參與對(duì)胞內(nèi)寄生的病原微生物的免疫應(yīng)答及對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答，參與遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)和自身免疫病的形成，參與移植排斥反應(yīng)及對(duì)體液免疫的調(diào)節(jié)。也可以說(shuō)，在抗感染免疫中，細(xì)胞免疫既是抗感染免疫的主要力量，參與免疫防護(hù)；又是導(dǎo)致免疫病理的重要因素。

2.免疫診斷方法有哪些

應(yīng)用免疫學(xué)的理論、技術(shù)和方法診斷各種疾病和測(cè)定免疫狀態(tài)。

在醫(yī)學(xué)上，它是確定疾病的病因和病變部位，或是確定機(jī)體免疫狀態(tài)是否正常的重要方法。此外，還應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)的血跡鑒定、生物化學(xué)的血清成分鑒定和物種進(jìn)化關(guān)系的研究等。

可在體內(nèi)和體外進(jìn)行。從免疫學(xué)的角度免疫診斷可應(yīng)用于：（1）檢查免疫器官和功能發(fā)生改變的疾病：如免疫缺陷病、自身免疫病。

（2）由免疫機(jī)制引起的疾?。喝巛斞磻?yīng)、移植排斥反應(yīng)。（3）一些內(nèi)分泌性的疾?。簭呐R床學(xué)的角度來(lái)說(shuō)，免疫診斷可應(yīng)用于檢查傳染性疾病、免疫性疾病、腫瘤和其他臨床各科疾病。

就所檢測(cè)的反應(yīng)物免疫診斷大致可以分為兩類，即：（1）免疫血清學(xué)診斷：檢測(cè)病人血清或組織內(nèi)有無(wú)特異性抗體或特異性抗原。（2）免疫細(xì)胞學(xué)診斷：測(cè)定病人細(xì)胞免疫力的有無(wú)和強(qiáng)弱。

免疫診斷須體現(xiàn)3項(xiàng)要求：（1）特異性強(qiáng)，盡量不出現(xiàn)交叉反應(yīng)，不出現(xiàn)假陽(yáng)性，以保證診斷的準(zhǔn)確性。（2）靈敏度高，能測(cè)出微量反應(yīng)物質(zhì)和輕微的異常變化，有利于早期診斷和排除可疑病例。

（3）簡(jiǎn)便、快速、安全。

3.免疫缺陷病需要檢查哪些

對(duì)所有免疫缺陷病例，必須選作一些實(shí)驗(yàn)室檢查以確立診斷；而在作相應(yīng)治療之前，通常還須作一些先進(jìn)試驗(yàn)對(duì)疾病作進(jìn)一步分類。

一般來(lái)說(shuō)，多數(shù)機(jī)構(gòu)和醫(yī)院能作篩查試驗(yàn)，多數(shù)大醫(yī)院能作先進(jìn)試驗(yàn)，特殊試驗(yàn)則只有一些實(shí)驗(yàn)室或配備高水平免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)院才能進(jìn)行。 當(dāng)懷疑免疫缺陷時(shí)，建議進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室篩查試驗(yàn)，包括全部血細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)；測(cè)定IgG,IgM和IgA濃度；抗體功能測(cè)定；感染的臨床和實(shí)驗(yàn)室判斷。

血細(xì)胞計(jì)數(shù)可發(fā)現(xiàn)貧血，血小板減少，中性粒細(xì)胞減少或白細(xì)胞增多。應(yīng)計(jì)數(shù)淋巴細(xì)胞總數(shù)，如有淋巴細(xì)胞減少（免疫球蛋白濃度測(cè)定也屬于最先篩查的項(xiàng)目之一，但I(xiàn)gD和IgE濃度最初不測(cè)。

對(duì)于免疫球蛋白的解釋需謹(jǐn)慎從事，因?yàn)橛酗@著的年齡性差異；以成人的標(biāo)準(zhǔn)，所有2~6個(gè)月的嬰兒均有低γ球蛋白血癥。因此免疫球蛋白濃度必須與同年齡對(duì)照組的正常濃度相比較。

一般免疫球蛋白濃度在同年齡2SD（標(biāo)準(zhǔn)差）范圍內(nèi)為正常?？偯庖咔虻鞍诐舛龋↖gG+IgM+IgA）>600mg/dl，或IgG>400mg/dl同時(shí)抗體功能試驗(yàn)正常者，可排除抗體缺陷。

總免疫球蛋白濃度抗體篩查試驗(yàn)也被推薦用于初篩。用同種凝集素滴度（抗A和/或抗B）估計(jì)IgM抗體功能。

除若所有這些篩查試驗(yàn)均正常，則免疫缺陷（特別是抗體缺陷）可排除。但若證實(shí)有慢性感染，病史毫無(wú)疑問(wèn)或篩查試驗(yàn)陽(yáng)性，則必須進(jìn)一步作高級(jí)試驗(yàn)檢查。

B細(xì)胞（抗體）缺陷的試驗(yàn)只要總免疫球蛋白很低（若總免疫球蛋白較低，可用熒光抗B細(xì)胞特異抗體（如CD19,CD20）經(jīng)流式細(xì)胞儀來(lái)計(jì)算B細(xì)胞。 正常外周血中淋巴細(xì)胞的10%~20%為膜表面免疫球蛋白陽(yáng)性細(xì)胞（B細(xì)胞）。

其次，進(jìn)行血清IgG亞類，IgD和IgE濃度測(cè)定。IgG1亞類濃度（與IgG相似）與年齡明顯有關(guān)，通常在2歲后，IgG1某些情況需作其他B細(xì)胞缺陷的試驗(yàn)（表147-5）。

在淋巴結(jié)病時(shí)或者為了除外惡性腫瘤或感染時(shí)，可作淋巴結(jié)活檢（有時(shí)需先免疫鄰近的肢體）。IgG濃度正?；蚪咏６锌贵w功能缺陷時(shí)，需作IgG亞類分析。

可能存在4個(gè)亞類中某一亞類的選擇性缺陷。如懷疑有IgG分解加速或經(jīng)皮膚或胃腸道丟失時(shí)，則作IgG壽命檢查；如病人IgG濃度低下，可靜脈給予大劑量免疫球蛋白，然后每日測(cè)定IgG濃度以確定其半衰期。

若有嚴(yán)重感染，可測(cè)分泌物（淚液或唾液）中的免疫球蛋白濃度。還可體外檢測(cè)IgG合成以及對(duì)特異抗原如噬菌體或鑰孔血藍(lán)蛋白的抗體反應(yīng)來(lái)確定抗體合成阻斷的確切部位。

在一些遺傳缺陷的疾病，經(jīng)用特殊的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)?zāi)馨l(fā)現(xiàn)突變的基因或突變的基因產(chǎn)物（如在X連鎖無(wú)γ球蛋白血癥所證實(shí)的Bruton酪氨酸激酶基因）T細(xì)胞缺陷的試驗(yàn)持久而極度嚴(yán)重的淋巴細(xì)胞減少提示T細(xì)胞缺陷。 然而淋巴細(xì)胞減少并不常見(jiàn)。

胸部X線檢查是篩查嬰兒T細(xì)胞缺陷的有用方法。對(duì)新生兒特別是在感染或其他能使胸腺變小的應(yīng)激狀況發(fā)作前作X線檢查，如看不到胸腺影像，提示有T細(xì)胞缺陷。

遲發(fā)型皮膚超敏反應(yīng)試驗(yàn)對(duì)2歲以上兒童是有價(jià)值的篩查T(mén)細(xì)胞缺陷的試驗(yàn)。可用以下的抗原：流行性腮腺炎抗原，念珠菌抗原（1:100），液體破傷風(fēng)類毒素（1:10）和毛癬菌抗原。

幾乎所有成人以及大多數(shù)免疫嬰兒和兒童會(huì)對(duì)其中一種或幾種抗原發(fā)生反應(yīng)，于48小時(shí)出現(xiàn)直徑>5mm的紅斑和硬結(jié)。存在一個(gè)或一個(gè)以上陽(yáng)性遲發(fā)型皮膚試驗(yàn)通常表明T細(xì)胞系統(tǒng)未受損。

診斷細(xì)胞免疫最有價(jià)值的先進(jìn)試驗(yàn)是T細(xì)胞和T細(xì)胞亞群（輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞和抑制/細(xì)胞毒細(xì)胞）的計(jì)數(shù)。 通常采用T細(xì)胞特異性的鼠單克隆抗體經(jīng)流式細(xì)胞儀作檢測(cè)。

應(yīng)用全T細(xì)胞抗體（抗CD3，抗CD2）檢測(cè)總T細(xì)胞，抗CD4抗體檢測(cè)T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞，抗CD8抗體檢測(cè)T抑制/細(xì)胞毒細(xì)胞（這些試驗(yàn)已替代羊紅細(xì)胞花結(jié)法計(jì)數(shù)T細(xì)胞）。當(dāng)輔助T細(xì)胞（CD4）計(jì)數(shù)1。

0。此比值倒置也提示T細(xì)胞免疫缺陷（在艾滋病CD4/CD8比值降低表示免疫系統(tǒng)進(jìn)行性受損）。

單克隆抗體也能有效地檢測(cè)激活的細(xì)胞（CD25），自然殺傷細(xì)胞（CD16和CD56）和不成熟的T細(xì)胞胸腺細(xì)胞）抗原（CD1）。測(cè)量病人淋巴細(xì)胞增殖和增大（轉(zhuǎn)化）能力的另一種有效的先進(jìn)試驗(yàn)是將有絲分裂原（如植物血凝素，刀豆素A），照射過(guò)的同種白細(xì)胞（用于混和白細(xì)胞反應(yīng)）或病人過(guò)去接觸過(guò)的抗原，與淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)。

在這些刺激之下，正常淋巴細(xì)胞急速分裂，這可用形態(tài)學(xué)方法或?qū)⒎派湫孕叵汆奏饺敕至鸭?xì)胞的方法予以測(cè)定。增殖程度通常用指數(shù)表示---受刺激細(xì)胞的每分鐘計(jì)數(shù)（CPM）與等量未受刺激細(xì)胞的每分鐘計(jì)數(shù)的比值。

T細(xì)胞缺陷病人存在與免疫受損程度一致的增殖應(yīng)答低下甚至消失的現(xiàn)象。 對(duì)有絲分裂原（能激活所有細(xì)胞）的增殖反應(yīng)（刺激指數(shù)50~100）明顯地高于對(duì)抗原或同種細(xì)胞的反應(yīng)（刺激指數(shù)3~30）。

還可進(jìn)行特殊試驗(yàn)測(cè)定在有絲分裂原或抗原刺激后淋巴因子的生成。淋巴因子有30多種，但通常測(cè)定γ-干擾素（IFN-γ）和白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)和α-腫瘤壞死因子。

部分病人有相應(yīng)的增殖反應(yīng)，但淋巴因子生成低下。另一組特殊試驗(yàn)可測(cè)定細(xì)胞毒功能。

使用不同的腫瘤細(xì)胞或病毒感染的靶細(xì)胞測(cè)定不同類型的細(xì)胞毒（自然殺傷細(xì)胞，抗體依賴性細(xì)胞毒或細(xì)胞。