簡(jiǎn)單染色法注意事項(xiàng)

1.普通顯微鏡的使用及細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些

普通顯微鏡的使用：1.低倍鏡的使用方法 （1）取鏡和放置：顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中，用時(shí)從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座，將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座后端距桌邊1-2寸為宜，便于坐著操作。

（2）對(duì)光：用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器（切忌手持物鏡移動(dòng)），使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔（當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)聽(tīng)到碰叩聲時(shí)，說(shuō)明物鏡光軸已對(duì)準(zhǔn)鏡筒中心）。打開(kāi)光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察（右眼睜開(kāi)），同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

（3）放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。 （4）調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺(tái)時(shí)，切勿在目鏡上觀察。

一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升，以免上升過(guò)多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼在目鏡上觀察，左手順時(shí)針?lè)较蚓徛D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心（注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的）。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過(guò)升降集光器的位置或開(kāi)閉光圈的大小來(lái)調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí)，鏡臺(tái)下降已超過(guò)工作距離（>5.40mm）而未見(jiàn)到物象，說(shuō)明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺(tái)。

2.高倍鏡的使用方法 （1）選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。（2）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察（防止高倍鏡頭碰撞玻片），如高倍鏡頭碰到玻片，說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調(diào)好，應(yīng)重新操作。

（3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5-1圈，即可獲得清晰的物象（切勿用粗調(diào)節(jié)器?。?如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，必須順時(shí)針（切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向）轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。3.油鏡的使用方法 （1）在使用油鏡之前，必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察，然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。

（2）將集光器上升到最高位置，光圈開(kāi)到最大。（3）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開(kāi)通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時(shí)，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。

（4）用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時(shí)應(yīng)按：低倍→高倍→油鏡程序。

在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍→油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭。（5）油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。

顯微鏡使用的注意事項(xiàng)：1. 持鏡時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢(shì)，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。2. 輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的邊緣，以免碰翻落地。

3. 保持顯微鏡的清潔，光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機(jī)械部分用布擦拭。4. 水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺(tái)，如果沾污應(yīng)立即擦凈。

5. 放置玻片標(biāo)本時(shí)要對(duì)準(zhǔn)通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。6. 要養(yǎng)成兩眼同時(shí)睜開(kāi)的習(xí)慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。

7. 不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。8. 使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)，其步驟是：取下標(biāo)本片，轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開(kāi)通光孔，下降鏡臺(tái)，平放反光鏡，下降集光器（但不要接觸反光鏡）、關(guān)閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實(shí)驗(yàn)臺(tái)柜內(nèi)。

最后填寫使用登記表。（注：反光鏡通常應(yīng)垂直放，但有時(shí)因集光器沒(méi)提至應(yīng)有高度，鏡臺(tái)下降時(shí)會(huì)碰壞光圈，所以這里改為平放） 細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法：1. 涂片：用灼燒滅菌冷卻后的接種環(huán)挑取少量菌體與水滴充分混勻，涂成極薄的菌膜.2. 干燥：可自然晾干，或?qū)⑼科糜诨鹧娓咛幬岷娓?，但不能直接在火焰上烘?3. 固定：手執(zhí)玻片一端，有菌膜的一面朝上，通過(guò)迅速通過(guò)火焰2-3次（用手指觸涂片反面，以不燙手為宜）.4. 染色：加適量（以蓋滿菌膜為度）結(jié)晶紫染色液（或石炭酸復(fù)紅液），染l~2min.5. 水洗：用自來(lái)沖洗至流下的水中無(wú)染色液的顏色時(shí)為止.6. 干燥7. 鏡檢 細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法注意事項(xiàng)：1. 革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色。

如脫色過(guò)度，革蘭氏陽(yáng)性菌也可被脫色而染成陰性菌；如脫色時(shí)間過(guò)短，革蘭氏陰性菌也會(huì)被染成革蘭氏陽(yáng)性菌。脫色時(shí)間的長(zhǎng)短還受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響，難以嚴(yán)格規(guī)定。

2. 染色過(guò)程中勿使染色液干涸。用水沖洗后，應(yīng)吸去玻片上的殘水，以免染色液被稀釋而影響染色效果。

3. 選用幼齡的細(xì)菌。G+菌培養(yǎng)12h-16h,E.coli培養(yǎng)。

2.簡(jiǎn)單染色發(fā)中各種步驟的注意事項(xiàng)是什么

革蘭染色過(guò)程所用四種不同溶液和作用： 1、堿性染料：這在簡(jiǎn)單染色中已討論過(guò)，此處用結(jié)晶紫. 2、媒染劑：其作用是增強(qiáng)染料與細(xì)菌的親和力，更好地加強(qiáng)染料與細(xì)胞的結(jié)合.常用的媒染劑是碘液. 3、脫色劑：幫助染料從被染色的細(xì)胞中脫色.利用細(xì)菌對(duì)染料脫色的難易程度不同，而將細(xì)菌加以區(qū)分.革蘭陽(yáng)性細(xì)菌不易被脫色劑脫色，而革蘭陰性細(xì)菌則易被脫色.常用的脫色劑是丙酮或乙醇，這里所用的是95%的乙醇. 4、復(fù)染液：也是一種堿性染料，目的是使脫色的細(xì)菌重新染上另一種顏色，以便與未脫色菌進(jìn)行比較.這里用的是蕃紅花紅溶液. 革蘭染色的實(shí)驗(yàn)步驟 1.涂片：左手持菌液試管，右手持接種環(huán)，用接種環(huán)從試管培養(yǎng)液中取一環(huán)菌，于載玻片中央涂成薄層（事先在背面做好標(biāo)記圓圈）即可，或先滴一小滴無(wú)菌水于載玻片中央，用接種環(huán)從斜面上挑出少許，與載玻片上的水滴混合均勻，涂成一薄層. 拔或塞試管塞時(shí)，應(yīng)將試管口通過(guò)火焰略加燒灼，最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌. 2.干燥：涂片后在室溫下自然干燥，也可在酒精燈上略加溫，使之迅速干燥，但勿靠近火焰. 3.固定：常用高溫進(jìn)行固定.即手持載玻片一端，標(biāo)本面朝上，在燈的火焰外側(cè)快速來(lái)回移動(dòng)3~4次，共約3~4秒.要求玻片溫度不超過(guò)60℃，以玻片背面觸及手背皮膚不覺(jué)過(guò)燙為宜，放置待冷后染色. 固定的目的是： ① 殺死微生物，固定其細(xì)胞結(jié)構(gòu)； ② 保證菌體能牢固地粘附在載玻片上，以免水洗時(shí)被水沖掉； ③ 改變菌體對(duì)染料的通透性，一般死細(xì)胞原生質(zhì)容易著色. 4.染色：將固定好的涂片放于報(bào)紙上，每次滴加一滴染液進(jìn)行染色. 注意：乙醇脫色時(shí)滴加乙醇至流出液為無(wú)色立即進(jìn)行水洗； 蕃紅復(fù)染由于時(shí)間較長(zhǎng)，應(yīng)在染液干燥前補(bǔ)加染液； 鏡檢時(shí)吸水注意不要擦標(biāo)本. 革蘭染色的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 如果將細(xì)菌做革蘭染色，凡染后菌體呈藍(lán)紫色的，稱為“革蘭陽(yáng)性菌”；菌體是伊紅色，稱“革蘭陰性菌”.無(wú)論陽(yáng)性菌還是陰性菌，都有桿菌和球菌.葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌是臨床最為常見(jiàn)的病原菌，葡萄球菌屬于革蘭陽(yáng)性菌，大腸桿菌屬于革蘭陰性菌中的腸桿菌科，除大腸桿菌以外，臨床較常見(jiàn)的腸桿菌科細(xì)菌還有變形桿菌屬，沙門菌屬、克霉白菌屬；銅綠假單胞菌是臨床常見(jiàn)的較耐藥革蘭陰性桿菌.。

3.普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)有哪些

由于細(xì)菌體積小且透明，在活體細(xì)胞內(nèi)又含有大量的水分，因此，對(duì)光線的吸收和反射與水溶液相差不大。

當(dāng)把細(xì)菌懸浮在水滴內(nèi)，放在顯微鏡下觀察時(shí)，由于與周圍背景沒(méi)有顯著的明暗差，難于看清它們的形狀，更談不上識(shí)別其細(xì)微結(jié)構(gòu)。而經(jīng)過(guò)染色，就可借助顏色的反襯作用比較清楚地看到菌體形態(tài)，亦即菌體表面及內(nèi)部結(jié)構(gòu)著色與背景形成鮮明對(duì)比，這樣便可在下清晰地觀察到微生物的形狀和結(jié)構(gòu)，而且還可以通過(guò)不同的染色反應(yīng)來(lái)鑒別微生物的類型和區(qū)分死、活細(xì)菌等，因此，染色技術(shù)是觀察細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的重要手段。

4.革蘭氏染色步驟的操作注意事項(xiàng)

革蘭氏染色最常用的細(xì)菌鑒別染色法之一。

未經(jīng)染色之細(xì)菌，由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比，可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征，而用以分類鑒定。

革蘭氏染色屬?gòu)?fù)染法，即將標(biāo)本固定后，先用龍膽紫染色，加碘液媒染后用酒精脫色，再用稀釋復(fù)紅復(fù)染。染色后除可以看到細(xì)菌形態(tài)外，還可將細(xì)菌分為兩大類，即不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）。

被酒精脫色復(fù)染成紅色者為革蘭氏陰性菌（G-）。革蘭氏染色原理尚不肯定，可能與細(xì)菌所帶核糖核酸、細(xì)菌壁結(jié)構(gòu)通透性、等電點(diǎn)等因素有關(guān)。

致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉?xiàng)U菌、碳疽桿菌等屬革蘭氏染色陽(yáng)性菌。百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等均屬革蘭氏陰性。

所以根據(jù)細(xì)菌的革蘭氏染色性質(zhì)，可以縮小鑒定范圍，有利于進(jìn)一步分離鑒定，以對(duì)疾病做出診斷。又由于各種抗生素的抗菌譜不同，革蘭氏染色尚可做為選用抗生素的參考。

5.一般的染色方法有哪些.需要具體解釋

在微生物學(xué)主要有兩種染色方法：

一、簡(jiǎn)單染色：利用單一染料對(duì)菌體進(jìn)行染色。主要步驟：涂片、干燥、固定、染色、水洗、鏡檢。

常用的微生物細(xì)胞染料都是鹽，分酸性染料和堿性染料兩大類：

美蘭、甲基紫、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠和蕃紅等都屬于堿性染料；

伊紅、剛果紅、藻紅、苦味酸和酸性復(fù)紅等屬于酸性染料。

二、革蘭氏染色法：原理與革蘭氏陰、陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)差異有關(guān)。主要用于區(qū)分這兩種細(xì)菌。被染成藍(lán)紫色者即為革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）；被染成紅色者是革蘭氏陰性菌（G-）。主要步驟：制片、初染、媒染、脫色、復(fù)染、鏡檢。

6.細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色方法怎樣操作

(1)觀察微生物時(shí)為什么必須采用染色方法細(xì)菌、真菌、和其他微生物的細(xì)胞質(zhì)是透明的，不借助染色方法很難觀察到這些微生物。

(2)簡(jiǎn)單染色的生化原理

細(xì)菌細(xì)胞通常帶負(fù)電荷，簡(jiǎn)單染色時(shí)采用已知的、帶正電荷的堿性染料與菌體細(xì)胞黏附使菌體著色。經(jīng)染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明對(duì)比。

生物幫上面有這方面的詳細(xì)介紹， 電鏡，電子顯微鏡，電子顯微鏡原理，掃描電鏡，透射電鏡。

7.HE染色的方法步驟及注意事項(xiàng)

一、實(shí)驗(yàn)步驟：

(1)樣品制備：對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1*105/ml，滴加于蓋玻片上（置于6孔板中），培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS 洗滌3次。

(2)樣品固定：95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次，每次1min。

(3)染核：蘇木素染液染色2-3min，自來(lái)水洗滌。

(4)分色：鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過(guò)深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來(lái)水洗滌。

(5)染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來(lái)水洗滌。

(6)吹干或自然晾干細(xì)胞 爬片后，中性樹(shù)膠封片。

若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，蘇木素染色12-15min，伊紅5min即可。

二、注意事項(xiàng)：

1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng)，組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此，要在自來(lái)水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行，一般以細(xì)胞核染色清楚（晰）而細(xì)胞質(zhì)基本無(wú)色為佳。如果過(guò)分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。

3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。

4、在染色過(guò)程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。

5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。

6、最后封固時(shí)，要用中性樹(shù)脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會(huì)褪色，所用樹(shù)脂濃度要適當(dāng)，樹(shù)脂封固時(shí)不能有氣泡。

擴(kuò)展資料

一、細(xì)胞核染色原理：

蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。

使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

二、細(xì)胞漿染色原理：

細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí)，胞漿對(duì)外不顯電性，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。

當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí)，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽(yáng)離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色。

伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽(yáng)離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織，嗜伊紅顆料等被感染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。

參考資料來(lái)源：搜狗百科-he染色

8.細(xì)菌簡(jiǎn)單染色

簡(jiǎn)單染色法是利用單一染料對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色的一種方法。此法操作簡(jiǎn)便，適用于菌體一般形狀和細(xì)菌排列的觀察。

常用堿性染料進(jìn)行簡(jiǎn)單染色，這是因?yàn)椋涸谥行?、堿性或弱酸性溶液中，細(xì)菌細(xì)胞通常帶負(fù)電荷，而堿性染料在電離時(shí)，其分子的染色部分帶正電荷（酸性染料電離時(shí)，其分子的染色部分帶正電荷），因此堿性染料的染色部分很容易與細(xì)菌結(jié)合使細(xì)菌著。染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明的對(duì)比，在顯微鏡下更易于識(shí)別。

常用作簡(jiǎn)單染色的染料有：美藍(lán)、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅等。

你使用草酸銨結(jié)晶紫染色液，染色迅速，著色深，菌體呈紫色。

9.HE染色的方法步驟及注意事項(xiàng)

HE染色步驟：

1、脫蠟，脫蠟二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分鐘，事先準(zhǔn)備好蓋玻片。

2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分鐘，自來(lái)水沖洗5分鐘*3。

3.、蘇木精染色5分鐘，根據(jù)染色情況，可以適當(dāng)增加或減少染色時(shí)間，流水沖洗。

4、5%乙酸分化1分鐘，流水沖洗，用吸管滴加乙酸，布滿玻片上的組織即可，分化后顏色變淺了一些，成為藍(lán)色。

5、返藍(lán)：返藍(lán)液，實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有，也可不用。

6、伊紅染色1分鐘，根據(jù)染色情況，可以適當(dāng)增加或減少染色時(shí)間，流水沖洗。

7、脫水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分鐘，可以在通風(fēng)櫥自然晾干再封

片，約5分鐘左右。

8、滴上中性樹(shù)膠，封片，用吸管滴上一滴即可，盡量少滴，但壓片后要將組織全部覆蓋完，避免中間有氣泡。

擴(kuò)展資料：

he染色原理：

易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性（ basophilia ）和嗜酸性（ acidophilia ）；而對(duì)堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia）。

構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。

而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時(shí)，則原來(lái)被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時(shí)，原來(lái)被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴?/p>

所以說(shuō)染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

參考資料來(lái)源：百度百科—he染色