血液粘度檢測分析報告
1 血液粘度計的選擇
重復(fù)性:指所測數(shù)值重復(fù)性程度。取同一血樣,壓積在40%~45%范圍內(nèi),按照儀器操作規(guī)程測量10次,在高剪切率200s-1時,血液表觀粘度的變異系數(shù)應(yīng)小于2%;低剪切率1s-1時,變異系數(shù)應(yīng)小于5%。血樣用量應(yīng)根據(jù)儀器的樣品用量而定,并應(yīng)嚴(yán)格控制樣品計量的精度。樣品量的過多或過少都將對測量結(jié)果產(chǎn)生影響,同時,標(biāo)本在吸入時不要產(chǎn)生氣泡。為保證儀器的正常工作和精確性,要做好日常維護(hù)和定期保養(yǎng),并做好保養(yǎng)維護(hù)記錄。同時對儀器的準(zhǔn)確度、分辨率和重復(fù)性應(yīng)定期標(biāo)定。
準(zhǔn)確度:指所測數(shù)值與真值(給定)符合的程度。測定時建議以國家計量標(biāo)準(zhǔn)油為標(biāo)準(zhǔn),在剪切率200s-1時測定低粘度油(2~3mPa·s),在剪切率1s-1時,測定高粘度油(15~25mPa·s),一般應(yīng)測定5次以上,在低粘度值時測定值與真值的相對偏差應(yīng)小于5%,高粘度值時測定值與真值的相對偏差應(yīng)小于3%。
分辨率:在給定條件下,測定出同一物質(zhì)兩種狀態(tài)下的差異。取壓積在40%~50%范圍內(nèi)的正常人全血,以自身血漿調(diào)節(jié)壓積的變化。在高剪切率200s-1時,儀器應(yīng)能分辨出壓積變化2%時的血液表觀粘度的差異,在低剪切率1s-1時,儀器應(yīng)能分辨出壓積變化1%時的血液表觀粘度的差異。以上測量應(yīng)各測5次以上,取平均值。
2 樣品采集、血樣防凝
血液樣品的采集應(yīng)保持一致。采血時病人取坐位,清晨空腹安靜狀態(tài)下,采集肘前靜脈血。采血時應(yīng)盡量縮短壓脈帶的壓迫時間,針頭刺入血管后立即松開壓脈帶,安靜約5s后開始采血。最好用7號以上的針頭,采血過程中不宜過快。以避免過細(xì)的針頭對紅細(xì)胞產(chǎn)生一定的剪切力而破壞紅細(xì)胞。
血液需經(jīng)抗凝處理后才能用于測量,抗凝劑對血液流變特性的影響不可忽視。最好用肝素或EDTA抗凝。肝素抗凝濃度一般為每毫升全血用20~30國際單位,EDTA為每毫升全血3.4~4.8mmol/L??鼓齽┮话悴捎霉滔嗷蛞合嗫鼓齽?。如用液相抗凝劑一般放在干燥玻璃管或玻璃瓶中,烘干后使用,烘干溫度一般不超過56℃。采血完畢后,先取下針頭,將血液沿管壁緩緩注入,輕輕搖勻,避免劇烈震動造成溶血。同一批實驗應(yīng)采用同一批號同種抗凝劑。
3 血樣保存
血樣應(yīng)隨采隨測。一般采血后20min即可用于測量,并應(yīng)于采集后2h以內(nèi)完成流變學(xué)參數(shù)的測定。如需放置應(yīng)在室溫下(18~25℃)密封保存,不宜放入冰箱,存放時間以不超過4h為宜,否則將影響血液的生理狀態(tài)和流變特性。存放血在測量前要充分搖勻。以3000~3500轉(zhuǎn)/min(離心力為1500~2000g) 離心30min,提取上層血漿測量血漿粘度。血漿為牛頓流體。
4 紅細(xì)胞比積測量
常用文氏管。此法不但結(jié)果準(zhǔn)確,且可同時觀察紅細(xì)胞沉降率。將血樣加入,讀取完紅細(xì)胞沉降率后,以相對離心力2260g,離心30min,讀取紅細(xì)胞柱的高度(以紅細(xì)胞上層的黑線薄層為準(zhǔn))。紅細(xì)胞壓積%=紅細(xì)胞柱的高度/全血高度×100,紅細(xì)胞壓積管必須清潔干燥,電源、電壓及離心機(jī)載重均可影響離心機(jī)的'轉(zhuǎn)速,因此應(yīng)安裝穩(wěn)壓裝置和固定離心機(jī)的載重。
5 測量溫度、測量順序
血液粘度的測量應(yīng)在37±0.5℃下測量。不同溫度的測量結(jié)果之間不能比較。外界溫度高時還應(yīng)考慮液體蒸發(fā)等因素對其流變特性的影響。對于剪切率可調(diào)的儀器在測量時應(yīng)考慮測量順序的影響。測量時應(yīng)采用一致的測量順序,從低剪切率開始逐漸增加或從高剪切力開始逐漸降低均可。但應(yīng)注意的是在低剪切率測量時隨著測量時間的增加,血樣中有形成分的沉降對測量結(jié)果的影響。兩種測量順序的結(jié)果不可互相比較。每次測定時,樣品池都應(yīng)清洗干燥,血樣及測量系統(tǒng)應(yīng)保持恒溫。加樣時不能有氣泡產(chǎn)生。
6 測量報告、正常值
檢測報告中應(yīng)給出高剪切力200s-1、中剪切力50s-1、低剪切力1s-1下的血液表觀粘度值及血漿粘度(單位為mPa·s)、壓積、血沉、紅細(xì)胞的聚集性、變形性等指標(biāo)。直接測量數(shù)據(jù)和經(jīng)公式計算得到的數(shù)據(jù)應(yīng)區(qū)別列出,同時要注明測定的溫度、檢測日期及操作人員簽名。血液粘度是血液流變特性的主要參數(shù)。正常值具有相對性,沒有普遍適用的正常值。即使采用通用的儀器和標(biāo)準(zhǔn)操作也是如此[1]。各實驗室應(yīng)根據(jù)生物體的個體差異、地區(qū)差異、儀器差異等原因,建立自己的正常值。正常值應(yīng)按男女、年齡等合理分組。當(dāng)測定值與正常值之差(絕對值)大于2倍正常值標(biāo)準(zhǔn)差時,可以認(rèn)為是血液粘度異常。
血液粘度檢測的質(zhì)量控制
【關(guān)鍵詞】 血液粘度;檢測;質(zhì)量控制
近年來,血液粘度的檢測在臨床上的應(yīng)用越來越廣泛,但由于血液流變影響因素的`多樣性和復(fù)雜性,國內(nèi)至今沒有統(tǒng)一的質(zhì)量控制。根據(jù)筆者長期的工作經(jīng)驗,參考不同的儀器狀況和國內(nèi)外的相關(guān)文獻(xiàn),制定了血液粘度檢測的質(zhì)量控制。
1 血液粘度計的選擇
血液粘度計應(yīng)選用切變率確定、流場均勻的儀器。在使用前,應(yīng)仔細(xì)了解說明書上所注明的儀器的準(zhǔn)確率、分辨率、重復(fù)性、溫度控制、測定時間等主要指標(biāo)。
準(zhǔn)確度:指所測數(shù)值與真值(給定)符合的程度。測定時建議以國家計量標(biāo)準(zhǔn)油為標(biāo)準(zhǔn),在剪切率200s-1時測定低粘度油(2~3mPa·s),在剪切率1s-1時,測定高粘度油(15~25mPa·s),一般應(yīng)測定5次以上,在低粘度值時測定值與真值的相對偏差應(yīng)小于5%,高粘度值時測定值與真值的相對偏差應(yīng)小于3%。
分辨率:在給定條件下,測定出同一物質(zhì)兩種狀態(tài)下的差異。取壓積在40%~50%范圍內(nèi)的正常人全血,以自身血漿調(diào)節(jié)壓積的變化。在高剪切率200s-1時,儀器應(yīng)能分辨出壓積變化2%時的血液表觀粘度的差異,在低剪切率1s-1時,儀器應(yīng)能分辨出壓積變化1%時的血液表觀粘度的差異。以上測量應(yīng)各測5次以上,取平均值。
重復(fù)性:指所測數(shù)值重復(fù)性程度。取同一血樣,壓積在40%~45%范圍內(nèi),按照儀器操作規(guī)程測量10次,在高剪切率200s-1時,血液表觀粘度的變異系數(shù)應(yīng)小于2%;低剪切率1s-1時,變異系數(shù)應(yīng)小于5%。
血樣用量應(yīng)根據(jù)儀器的樣品用量而定,并應(yīng)嚴(yán)格控制樣品計量的精度。樣品量的過多或過少都將對測量結(jié)果產(chǎn)生影響,同時,標(biāo)本在吸入時不要產(chǎn)生氣泡。
為保證儀器的正常工作和精確性,要做好日常維護(hù)和定期保養(yǎng),并做好保養(yǎng)維護(hù)記錄。同時對儀器的準(zhǔn)確度、分辨率和重復(fù)性應(yīng)定期標(biāo)定。
2 樣品采集
血液樣品的采集應(yīng)保持一致。采血時病人取坐位,清晨空腹安靜狀態(tài)下,采集肘前靜脈血。采血時應(yīng)盡量縮短壓脈帶的壓迫時間,針頭刺入血管后立即松開壓脈帶,安靜約5s后開始采血。最好用7號以上的針頭,采血過程中不宜過快。以避免過細(xì)的針頭對紅細(xì)胞產(chǎn)生一定的剪切力而破壞紅細(xì)胞。
3 血樣防凝
血液需經(jīng)抗凝處理后才能用于測量,抗凝劑對血液流變特性的影響不可忽視。最好用肝素或EDTA抗凝。肝素抗凝濃度一般為每毫升全血用20~30國際單位,EDTA為每毫升全血3.4~4.8mmol/L??鼓齽┮话悴捎霉滔嗷蛞合嗫鼓齽?。如用液相抗凝劑一般放在干燥玻璃管或玻璃瓶中,烘干后使用,烘干溫度一般不超過56℃。采血完畢后,先取下針頭,將血液沿管壁緩緩注入,輕輕搖勻,避免劇烈震動造成溶血。同一批實驗應(yīng)采用同一批號同種抗凝劑。
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