1、明膠沉淀法:明膠為一類蛋白質類成分,能與鞣質縮合之后產生大分子的沉淀物。使用方法為:將水提液中緩緩加入過量的明膠的飽和氯化鈉溶液,攪拌,待沉淀完全之后,抽濾,將沉淀物用丙酮溶解,抽濾,濾液減壓回收得到總鞣質。
2、凝膠柱色譜法:這種方法一般在要求得到鞣質單體時采用,將水溶液依次經Diaion HP-20、Toyopearl HW-40、MCI Gel CHP-20反復柱層析,用水及不同比例的甲醇或乙醇洗脫,各洗脫流分可用TLC或HPLC檢識合并,相同者合并,單一組分合并后回收溶劑,即可得到單體。
提出了一種中藥提取液去除鞣質的新方法--CuCl2沉淀法.利用鞣質分子中多個酚羥基作為配位體與Cu2+發(fā)生配合反應生抄成沉淀的特性,在保證藥物有效成分不被破壞的同時,對茶果冬青、五味子、紅景天、紅景天復方、仙鶴草、山豆根、杜仲、枳實、防己、荷葉、紫蘇等多種中藥除鞣效率均可超過95%,藥物的有效成分損失小,雜質離子的殘留量低.試驗考察了CuCl2加入量,pH值對鞣質去除率及藥物有效成分損失率的影響.結果表明,隨著CuCl2用量的增加溶液中鞣質的殘留量也將達到一極限值,適宜zd的pH值為6.5~7.5.CuCl2沉淀法是一種新型、理想、高效的除鞣方法,適用于工業(yè)化生產.。
用于提取鞣質的最好的原料是剛剛采摘的原料,未變質的氣干原料也可應用。采摘的新鮮原料宜立即浸提,也可以用冷凍或浸泡在丙酮中的方法貯存。
浸提用溶劑應該是對鞣質優(yōu)良好的溶解能力,不與鞣質發(fā)生化學反應,浸出雜質少,易于分離的。此外還要低毒、安全、經濟、易得。水是鞣質的良好溶劑,有作者采用含亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉的水溶液提取石榴皮中的鞣質。有機溶劑和水的復合體系(有機溶劑占50%-70%)使用更為普遍,可選的有機溶劑有乙醇、甲醇、丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚等。丙酮-水體系對鞣質溶解能力最強,能夠打開鞣質-蛋白質的連接鍵,減壓蒸發(fā)易除去丙酮是目前使用最普遍的溶劑體系。
鞣質粗提物中含有大量的糖、蛋白質、脂類等雜質,加上鞣質本身是許多結構和理化性質十分接近的混合物,需進一步分離純化。通常采用有機溶劑分步萃取的方法進行初步純化,甲醇能使水解鞣質中的縮酚酸鍵發(fā)生醇解,乙酸乙酯能夠溶解多種水解鞣質及低聚的縮合鞣質,乙醚只溶解分子量小的多元酚。初步分離還可以采取皮粉法、醋酸鉛沉淀法、氯化鈉鹽析法、滲析法、超濾法和結晶法等。柱色譜是目前制備純鞣質及有關化合物的最主要方法,可選用的固定相有硅膠、纖維素、聚酰胺、聚苯乙烯凝膠,聚乙烯凝膠、葡聚糖凝膠等,其中又以葡聚糖凝膠Sephadex LH-20最為常用。
提出了一種中藥提取液去除鞣質的新方法--CuCl2沉淀法.利用鞣質分子中多個酚羥基作為配位體與Cu2+發(fā)生配合反應生抄成沉淀的特性,在保證藥物有效成分不被破壞的同時,對茶果冬青、五味子、紅景天、紅景天復方、仙鶴草、山豆根、杜仲、枳實、防己、荷葉、紫蘇等多種中藥除鞣效率均可超過95%,藥物的有效成分損失小,雜質離子的殘留量低.試驗考察了CuCl2加入量,pH值對鞣質去除率及藥物有效成分損失率的影響.結果表明,隨著CuCl2用量的增加溶液中鞣質的殘留量也將達到一極限值,適宜zd的pH值為6.5~7.5.CuCl2沉淀法是一種新型、理想、高效的除鞣方法,適用于工業(yè)化生產。
1.提取 提取鞣質的中藥原料最好用新鮮原料,且宜立即浸提,也可以用冷凍或浸泡在丙酮中的方法貯存。
原料的干燥宜在盡短的時間內完成,以避免鞣質在水分、日光、氧氣和酶的作用下變質醫(yī)學|教育網搜集整理。 提取將藥材粉碎,過篩,用95%乙醇冷浸或滲漉提取,提取液或滲漉液減壓濃縮成浸膏。
2.分離 (1)溶劑法:通常將含鞣質的水液先用乙醚等極性小的溶劑萃取,除去極性小的雜質,然后用乙酸乙酯提取,可得到較純的鞣質。亦可將鞣質粗品溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐漸加入乙醚醫(yī)學|教育網搜集整理,鞣質可沉淀析出。
(2)沉淀法:向含鞣質的水液中分批加入明膠溶液,濾取沉淀,用丙酮回流,鞣質溶于丙酮,蛋白質不溶于丙酮而析出。 (3)柱色譜法:普遍采用的固定相是Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,Sephadex LH-20及MCIGelC HP-20.以水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮為流動相(洗脫劑)。
(4)高效液相色譜法:HPLC法對鞣質不僅具有良好的分離效果,而且還可以用于判斷鞣質分子的大小、各組分的純度及α、β-異構體等,具有簡便、快速、準確、實用性強等優(yōu)點。
中草藥中鞣質的含量測定方法較多,根據(jù)鞣質的性質而有皮粉吸附法、重量法、高錳酸鉀法、絡合滴定法與比色法等,這些方法均各有優(yōu)缺點。
現(xiàn)簡介高錳酸鉀法:高錳酸鉀法是根據(jù)鞣質在酸住溶液中可被高錳酸鉀溶液氧化的艇,由消耗高錳酸鉀的量來計算中草藥中鞣質的含量測定方法較多,根據(jù)鞣質的性質而有皮粉吸附法、重量法、高錳酸鉀法、絡合滴定法與比色法等,這些方法均各有優(yōu)缺點?,F(xiàn)簡介高錳酸鉀法: 高錳酸鉀法是根據(jù)鞣質在酸住溶液中可被高錳酸鉀溶液氧化的原理,由消耗高錳酸鉀的量來計算鞣質含量。
1。
明膠沉淀法與改良明膠沉淀法 明膠是一種蛋白質,與鞣質在水溶液中能形成不溶性的鞣質蛋白,因而可除鞣質,該反應在pH4。0~5。
0時最靈敏。 (1)明膠沉淀法:在中藥水煎濃縮液中,加入2%~5%明膠溶液,至不產生沉淀為止,靜置、濾過除去沉淀,濾液濃縮后,加乙醇,使含量達75%以上,以除去過量明膠。
(2)改良明膠沉淀法:水煎液濃縮,加入2%~5%明膠后稍經放置,不須濾過即再加入乙醇至含酸量達70%~80%,靜置過夜,濾過即得。 2。
醇溶液調pH值法 將中藥的水煎液濃縮加入乙醇,使其含酸量達80%或更高,冷處放置,濾除沉淀后,用40%氫氧化鈉調至pH為8,此時鞣質生成鈉鹽且不溶于乙醇而析出,經放置,即可濾過除去。 3。
聚酰胺除鞣質法 聚酰胺又稱錦綸、尼龍、卡普隆,是由酰胺聚合而成的高分子化合物。分子內含有許多酰胺鍵,可與酚類、酸類、醌類、硝基類化合物形成考試,大收集整理氨鍵而吸附這些物質。
鞣質為多元酚的衍生物,亦可被吸附,從而達到除去的目的。 4。
鉛鹽沉淀法 醋酸鉛在水溶液或醇溶液中能沉淀有機酸、酸性皂甙、樹脂、鞣質、色素、蛋白質等。堿式醋酸鉛還能沉淀出某些含有醇基、酮類、醛基類物質,以及黃酮類、中性皂甙和少數(shù)生物堿。
本法是利用此性質用鉛鹽從提取液中沉淀出有效成分或分離除去雜質。 由于鉛鹽對人體有害,溶液中過量的鉛必須除盡。
除鉛的常用方法有:①硫酸和硫酸鈉法;②硫化氫法。
人家都是要提取咖啡因,去除單寧酸,你卻要提取單寧酸
只提供一個參考
單寧酸(簡稱單寧,又稱鞣酸或鞣質),分子式C14H10O9,易溶于水、酒精及醚等。
單寧酸主要用途是用于制革業(yè)作革鞣劑,印染業(yè)作媒染劑、固色劑。單寧酸還是制藍黑墨水的原料之一,是重要的制藥原料。
一、生產原料和原理
單寧酸是一種植物加工制品。五倍子及多種植物的葉、莖、樹皮、果殼等都含單寧酸的成分,而以五倍子中含量最高,一般五倍子含單寧55-60.5%。工業(yè)上單寧的提取,多以五倍子為原料,經軟水浸提、蒸發(fā)、干燥等工序。
二、生產工藝
1.除塵軋碎:將五倍子原料經電磁鐵除去鐵屑,送入軋碎機內軋碎,用篩子過篩,除去五倍子中的蟲尸和中的排泄物等雜質。
2.浸提:浸提的時間、溫度、加水量和抽出方法對浸提有很大關系。時間過短浸出率低,溫度過高浸出液中含非單寧色素就多,影響成品品質;加水量過多,蒸發(fā)時間長,多耗蒸發(fā)熱量,長期加熱,成品顏色過深。故浸提方法采用8個提桶(以銅或木材制成,絕不能用鐵)逆流循環(huán)浸出法,浸提4次。
浸提條件:溫度40-70℃,浸提時間72小時,加水量為原料量的4倍(浸提用水須軟水或蒸餾水),直接蒸汽加熱。
3.冷凍凈化:單寧酸浸出液是一種粘稠體,把濃度約8波美度的單寧液,溫度降到0℃,大粒子的單寧體就濃縮成膠狀物而沉淀,使上層溶液分離出來成溶解度很大的澄清單寧。冷凍凈化在木桶澄清槽中進行,冷凍時間一般24小時。
4.濃縮、干燥:將澄清單寧液在真空中下蒸發(fā)濃縮和干燥后,即成工業(yè)上所用的粉狀單寧。工業(yè)用粉狀單寧含單寧75-80%,灰分3%,水不溶物1.5-2%。醫(yī)藥上用的單寧是把五倍子原料用酒精抽浸,繼將浸出液用溫和的還原劑——重亞硫酸鈉漂白,蒸干后即為藥用單寧酸。
第一:溶劑法
溶劑萃取法是傳統(tǒng)的提取方法,利用多酚易溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯而不溶于氯仿的性質,將其從中分離出來。此法經過粗提,去雜,重結晶等主要過程得到茶多酚。 一般流程為:茶葉 沸水或含水乙醇浸提 過濾 濾液 氯仿萃取 乙酸乙酯萃取 濃縮干燥 粗品 本法操作簡單,易于工業(yè)化生產。但消耗大量有機溶劑,且使用了有毒的氯仿,造成有機溶劑殘留問題。另外得到的粗品含雜質較多。據(jù)文獻報道提取率一般為10%~20%。許旋等采用正交試驗法優(yōu)選出了綠茶中茶多酚提取產率的最佳工藝條件為95%乙醇提取1.5h,用等量氯仿萃取2次,最后再用等量乙酸乙酯萃取1次。而另有報道認為提取茶多酚的最佳條件為:乙醇濃度為80%,料液比1:10,提取時間30min。
第二, 金屬離子沉淀法
利用茶多酚在一定條件下可以和金屬離子絡合形成沉淀,在水溶劑中與其它物質分離,再在一定條件下解絡合提取茶多酚。 一般流程為:茶葉 沸水或含水乙醇浸提 粗提液 沉淀 過濾 沉淀轉溶 萃取 濃縮 干燥 粗品 常用的金屬離子有Al3+,Zn2+, Ba2+,Fe3+,Mg2+ ,Ca2+。相同條件下,它們對茶多酚的沉淀順序是:Al3+>Zn2+>Fe3+>Mg2+>Ba2+>Ca2+。Al3+會引發(fā)老年癡呆癥, Zn2+為人體所需元素,有報道采用Al3+和Zn2+作為復合沉淀劑,提取效果良好。林建平等采用Se4+提取,是目前文獻報道提取效率最高的方法。另外Se4+離子是人體所需的微量元素并具有一定的抗癌作用,此法值得關注。 金屬離子沉淀法是常用的茶多酚提取方法。不同金屬離子有不同的pH條件
要求,pH值太小沉淀不完全,太大易氧化茶多酚的結構,因此找到合適的pH條件是提取的關鍵。金屬離子的殘留是該法的缺點。
第三,層析法
層析法又稱色譜法。其原理是利用樣品組分在兩相之間的分配系數(shù)不同而分離。按其分離原理又可分四類,即吸附層析、排阻層析、離子交換層析和分配層析。吸附層析法是利用樹脂吸附劑能發(fā)生吸附和解吸附的作用特點來達到物質的分離和純化的目的。吸附樹脂對分子的吸附作用力微弱,只要改變體系的親水疏水平衡條件,就可以引起吸附增加或解吸附。樹脂吸附物質后,一般用甲醇等低沸點有機溶劑解吸附,吸附劑選擇性特殊,再生簡便,穩(wěn)定性高。據(jù)中國農科院茶葉研究所徐向群等研究,國產92-2和92-3吸附樹脂可用于分離提取茶多酚〔10〕。王梅等通過對樹脂的篩選,確定了NK-S3樹脂對茶多酚吸附--解吸附性能良好,選擇由乙醇、乙酸乙酯和水組成的混合液為洗脫劑〔11〕。另外,以聚酰胺、硅膠、氧化鋁作為填料也有較好的分離效果。排阻層析也稱凝膠柱層析,原理是利用凝膠柱的填料對溶解在流動相中的混合物具有不同的排阻作用,從而分離混合物。填料主要有Sephadex LH-20等。離子交換柱層析的原理是利用離子交換柱的可解離不溶性填料對溶解在流動相中的可解離混合物具有不同的離子交換作用分離混合物層析法一般流程為:茶葉 熱水或含水乙醇浸提 過濾 上層析柱 洗脫 濃縮 干燥 茶多酚粗品 層析法工藝能耗低,操作簡單,不使用毒性強的有機溶劑,產品質量高
第四其它方法 (1)超臨界二氧化碳萃取法 (2)濾膜法 (3)超聲提取法 (4)微波萃取法.
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