多糖除蛋白質(zhì)的方法(將剛提出的一種水溶性多糖要脫蛋白處理,方法)

1.將剛提出的一種水溶性多糖要脫蛋白處理,有哪些方法

除酶降解外，常用的去除多糖中蛋白質(zhì)的方法還有：Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法，這些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白質(zhì)沉淀，其中Sevag方法脫蛋白效果較好，它是用氯仿：戊醇或丁醇，以4:1比例混合，加到樣品中振搖，使樣品中的蛋白質(zhì)變性成不溶狀態(tài)，用離心法除去。

Sevage 法：利用蛋白質(zhì)在三氯乙烷等有機(jī)溶劑中變性的特點(diǎn)，將提取液與 Sevage試劑[氯仿：正丁醇=5:1(V/V)]5:1 混合，振蕩，離心，變性后的蛋白質(zhì)介于提取液與 Sevage 試劑交界處。此法的優(yōu)點(diǎn)是條件溫和，不會(huì)引起多糖的變性。

三氯醋酸法 于樣品液中加入適量的三氯醋酸，混勻后靜置過夜，離心過濾棄去濾渣，收集濾液，測定糖濃度和蛋白質(zhì)濃度。

2.提純多糖時(shí)用Sevage法除蛋白的具體方法

。。。。。。自己以后要多看資料，這是自己判斷的事情。

這個(gè)比例其實(shí)都行，沒有絕對的對錯(cuò)。你就選擇1:4 震蕩時(shí)間自己決定，應(yīng)為如果你要拖干凈的話，也可以多次每次時(shí)間短啊，這個(gè)和時(shí)間長次數(shù)少效果是一樣的。 離心好！并且告訴你樣品稍微多準(zhǔn)備點(diǎn)，如果你的樣品蛋白質(zhì)含量高，你去蛋白次數(shù)過多的話，你的樣品會(huì)在反復(fù)的轉(zhuǎn)移中損失很大。

順便帶上手套，口罩，這個(gè)東西是蛋白質(zhì)變性，弄到你手上最多吊點(diǎn)皮（如果你不在乎） 氣味很刺激。化學(xué)實(shí)驗(yàn)都是和毒品打交道，盡量注意安全衛(wèi)生。

3.如何去除多糖溶液中的蛋白質(zhì)雜質(zhì)

去除雜蛋白時(shí)，將多糖溶液：氯仿：正丁醇以25:5:1 體積比加入分液漏斗中，振搖30min后，8000r/min，離心10min去除白色沉淀。重復(fù)操作10~12次，直至無沉淀為止。

酶的活性受環(huán)境pH的影響極為顯著。通常各種酶只有在一定的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。一種酶表現(xiàn)其催化活性最高時(shí)的pH值稱為該酶的最適pH。低于或高于最適pH時(shí)，酶的活性逐漸降低。不同酶的最適pH值不同，例如，胃蛋白酶的最適pH為1.5一2.5，胰蛋白酶的最適pH為8等酶的最適pH受反應(yīng)物性質(zhì)和緩沖液性質(zhì)的影響。例如，唾液淀粉酶的最適PH約為6.8，但在磷酸緩沖液中，其最適pH為6.4一6.6，在醋酸緩沖液中則為5.6。

大濃度的話，結(jié)晶是個(gè)好辦法。糖的結(jié)晶比蛋白質(zhì)簡單多了。另外，層析也很簡單啊。有條件的話層析幾次就完全去除了。