實驗室中的滅菌方法(實驗室常用的滅菌方法)
1.實驗室常用的滅菌方法有哪些
主要包括以下三種：干熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌1.干熱滅菌法1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達滅菌目的，火焰滅菌通常用于無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌，防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，在烤箱內(nèi)加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂.干熱滅菌時裝入干烤箱內(nèi)的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底.2.濕熱滅菌法通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，溫度高，滅菌效果最好.注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣.有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規(guī)定的溫度，必須將冷空氣完全排除.否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規(guī)定的要求，滅菌就不徹底.3.紫外線 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制.紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜。.。
2.微生物學實驗室常用的滅菌方法有哪些
主要包括以下三種：干熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌 1.干熱滅菌法 1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達滅菌目的，火焰滅菌通常用于無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌，防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，在烤箱內(nèi)加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂.干熱滅菌時裝入干烤箱內(nèi)的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底. 2.濕熱滅菌法 通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，溫度高，滅菌效果最好. 注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣.有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規(guī)定的溫度，必須將冷空氣完全排除.否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規(guī)定的要求，滅菌就不徹底. 3.紫外線 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制. 紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜.。
3.實驗室常用的滅菌方法有干熱滅菌.高壓蒸汽滅菌.紫外線滅菌.過濾除菌
1.高壓蒸汽滅菌
為濕熱滅菌方法的一種。是微生物培養(yǎng)中最重要的滅菌方法。這種滅菌方法是基于水在煮沸時所形成的蒸汽不能擴散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密閉的情況下，隨著水的煮沸，蒸汽壓力升高，溫度也相應增高。壓力和溫度之間的關系見表9-1。
高壓蒸汽是最有效的滅菌法，能迅速地達到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下（121.6℃），15~30分鐘，所有微生物包括芽孢在內(nèi)都可殺死。它適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。
進行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽滅菌鍋。高壓蒸汽滅菌鍋是一個能耐壓又可以密閉的金屬鍋，有立式與臥式兩種。
可以用電熱、煤氣、蒸汽等。鍋上裝有壓力表，有的還裝有溫度計，能及時了解鍋內(nèi)壓力及溫度。鍋上還設有排氣口，其作用是在密閉之前，利用蒸汽將鍋內(nèi)的冷空氣排凈，另外還裝有安全活門，如果壓力超過一定限度，活門即可自動打開，放出過多的蒸汽。
2.干熱滅菌
微生物培養(yǎng)中常用的干熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進行。干熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高，時間也較濕熱滅菌長。這是因為蛋白質(zhì)在干燥無水的情況下不容易凝固。一般須在160℃左右保持恒溫3~4小時，方能達到滅菌的目的。
干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。
3.間歇滅菌
各種微生物的營養(yǎng)體在100℃溫度下半小時即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會失去生活力。間歇滅菌就是根據(jù)這一原理進行的。
間歇滅菌的方法是用100℃、30分鐘殺死培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的營養(yǎng)體，然后將這種含有芽孢和孢子的培養(yǎng)基在溫箱內(nèi)或室溫下放置24小時，使芽孢和孢子萌發(fā)成為營養(yǎng)體。這時再以100℃處理半小時，再放置24小時。如此連續(xù)滅菌3次，即可達到完全滅菌的目的。
間歇滅菌通常在流動蒸汽的滅菌鍋中進行，也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用于明膠、牛乳等物質(zhì)的滅菌，這類物質(zhì)在100℃以上的溫度下處理較長時間，會被破壞，而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用，又使被處理的物質(zhì)免遭破壞。
4.紫外線滅菌
紫外線殺菌力最強的是波長2650~2660?的部分。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。無菌室和緩沖間的照射時間為20~50分鐘（視房間大小而定），接種箱照射10~15分鐘即可。
為了加強紫外線滅菌的效果，在照射前，可在無菌室、緩沖間或接種箱內(nèi)噴灑5%石炭酸，以使空氣中附著有微生物的塵埃降落，同時也可以殺死一部分微生物。無菌室的工作臺的臺面和椅子，可用2~3%的來蘇兒擦洗。然后再照射紫外線。由于紫外線對人體有傷害作用，所以人不要直視正在照射的紫外線燈，也不要在照射情況下進行工作。
滅菌后，為了檢驗紫外線的滅菌效果，可以在無菌室、緩沖間或接種箱內(nèi)放一套盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，將皿蓋打開5~10分鐘，蓋好后，放入溫箱中培養(yǎng)。如果只有一、二個菌落，可認為滅菌效果良好。如雜菌叢生。則需延長照射時間或同時加強其它滅菌措施。
4.實驗室消毒滅菌方法
實驗室常用的消毒滅菌方法
一、消毒技術（一）明確消毒的主要對象 應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類，有針對性地使用消毒劑。（二）采取適當?shù)南痉椒?根據(jù)消毒對象選擇簡便
一、消毒技術
（一）明確消毒的主要對象
應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類，有針對性地使用消毒劑。
（二）采取適當?shù)南痉椒?/p>
根據(jù)消毒對象選擇簡便、有效、不損壞物品、來源豐富、價格適中的消毒方法。
醫(yī)院診療器械按污染后可造成的危害程度和在人體接觸部位不同分為三類：
1. 高度危險的器材
穿過皮膚、粘膜而進入無菌的組織或器官內(nèi)部，或與破損的皮膚粘膜密切接觸的器材，如手術器械、注射器、心臟起搏器等。必須選用高效消毒法（滅菌）。
2. 中度危險的器材
僅與皮膚、粘膜密切接觸，而不進入無菌組織內(nèi)，如內(nèi)窺鏡、體溫計、氧氣管、呼吸機及所屬器械、麻醉器械等。應選用中效消毒法，殺滅除芽胞以外的各種微生物。
3. 低度危險器材和物品
不進入人體組織，不接觸粘膜，僅直接或間接地與健康無損的皮膚接觸，如果沒有足夠數(shù)量的病原微生物污染，一般并無危害，如口罩、衣被、藥杯等，應選用低效消毒法或只作一般衛(wèi)生處理。只要求去除一般細菌繁殖體和親脂病毒。
（三）控制影響消毒效果的因素許多因素會影響消毒劑的作用，而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。
1. 微生物的種類
不同類型的病原微生物對消毒劑抵抗力不同，因此，進行消毒時必須區(qū)別對待。
1）細菌繁殖體
易被消毒劑消滅，一般革藍氏陽性細菌對消毒劑較敏感，革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感，消毒方法以熱力消毒為主。
(2)細菌芽胞
芽胞對消毒因子耐力最強，殺滅細菌芽胞最可靠的方法是熱力滅菌，電離輻射和環(huán)氧乙烷熏蒸法。在化學消毒劑中，戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞，但可靠性不如熱力滅菌法。
(3)病毒
對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異，親水病毒的耐力較親脂病毒強。
(4)真菌
對干燥、日光、紫外線以及多數(shù)化學藥物耐力較強，但不耐熱（60℃1小時殺滅）。
2. 微生物的數(shù)量
污染的微生物數(shù)量越多需要消毒的時間就越長，劑量越大。
3. 有機物的存在
①有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用，以致于微生物逐漸產(chǎn)生對藥物的適應性。②有機物和消毒劑作用，形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。③一部分消毒劑與有機物發(fā)生了作用，則對微生物的作用濃度降低。④有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大，對戊二醛影響較小。
4. 溫度
隨著溫度的升高，殺菌作用增強，但溫度的變化對各種消毒劑影響不同。如甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷的濕度升高1倍時，殺菌效果可增加10倍。而酚類和酒精受溫度影響小。
5. PH值
從兩方面影響殺菌作用。①對消毒劑的作用：改變其溶解度和分子結(jié)構(gòu)。②pH過高或過低對微生物的生長均有影響。在酸性條件下，細菌表面負電荷減少，陰離子型消毒劑殺菌效果好。在堿性條件下，細菌表面負電荷增多，有利于陽離子型消毒劑發(fā)揮作用。
6. 處理劑量與監(jiān)測
保證消毒、滅菌處理的劑量，加強效果監(jiān)測，防止再污染。
5.實驗室消毒方法有哪些
（一）物理消毒法1.機械消毒 一般應用肥皂刷洗，流水沖凈，可消除手上絕大部分甚至全部細菌，使用多層口罩可防止病原體自呼吸道排出或侵入.應用通風裝置過濾器可使手術室、實驗室及隔離病室的空氣，保護無菌狀態(tài).2.熱力消毒 包括火燒、煮沸、流動蒸氣、高熱蒸氣、干熱滅菌等.能使病原體蛋白凝固變性，失去正常代謝機能.（1）火燒 凡經(jīng)濟價值小的污染物，金屬器械和尸體等均可用此法.簡便經(jīng)濟、效果穩(wěn)定.（2）煮沸 耐煮物品及一般金屬器械均用本法，100℃1~2分鐘即完成消毒，但芽胞則須較長時間.炭疽桿菌芽胞須煮沸30分鐘，破傷風芽胞需3小時，肉毒桿菌芽胞需6小時.金屬器械消毒，加1~2%碳酸鈉或0.5%軟肥皂等堿性劑，可溶解脂肪，增強殺菌力.棉織物加1%肥皂水15l/kg，有消毒去污之功效.物品煮沸消毒時，不可超過容積3/4，應浸于水面下.注意留空隙，以利對流.（3）流動蒸氣消毒 相對濕度80~100%，溫度近100℃，利用水蒸氣在物何等表面凝聚，放出熱能，殺滅病原體.并當蒸氣凝聚收縮產(chǎn)生負壓時，促進外層熱蒸氣進入補充，穿至物品深處，加速熱量，促進消毒.（4）高壓蒸氣滅菌 通常壓力為98.066kPa，溫度121~126℃，15~20分鐘即能徹底殺滅細菌芽胞，適用于耐熱、潮物品.（5）干熱滅菌 干熱空氣傳導差，熱容量小，穿透力弱，物體受熱較慢.需160~170℃，1~2小時才能滅菌.適用于不能帶水份的玻璃容器，金屬器械等.不同病原體的熱耐受力，以熱死亡時間表達.3.輻射消毒 有非電離輻射與電離輻射二種.前者有紫外線，紅外線和微波，后者包括丙種射線的高能電子束（陰極射線）.紅外線和微波主要依靠產(chǎn)熱殺菌.電離輻射設備昂貴，對物品及人體有一定傷害，故使用較少.目前應用最多為紫外線，可引起細胞成份、特別是核酸、原漿蛋白和酸發(fā)生變化，導致微生物死亡.紫外線波長范圍2100~3280A，殺滅微生物的波長為2000~3000A，以2500~2650A作用最強.對紫外線耐受力以真菌孢子最強，細菌芽胞次之，細菌繁殖體最弱，僅少數(shù)例外.紫外線穿透力差，3000A以下者不能透過2mm厚的普通玻璃.空氣中塵埃及相對濕度可降低其殺菌效果.對水的穿透力隨深度和濁度而降低.但因使用方便，對藥品無損傷，故廣泛用于空氣及一般物品表面消毒.照射人體能發(fā)生皮膚紅斑，紫外線眼炎和臭氧中毒等.故使用時人應避開或用相應的保護措施.日光曝曬亦依靠其中的紫外線，但由于大氣層中的散射和吸收使用，僅39%可達地面，故僅適用于耐力低的微生物，且須較長時間曝曬.此外過濾除菌除實驗室應用外，僅換氣的建筑中，可采用空氣過濾，故一般消毒工作難以應用.（二）化學消毒法 根據(jù)對病原體蛋白質(zhì)作用，分為以下幾類.1.凝固蛋白消毒劑包括酚類、酸類和醇類.（1）酚類 主要有酚、來蘇、六氯酚等.具有特殊氣味，殺菌力有限.可使紡織品變色，橡膠類物品變脆，對皮膚有一定的刺激，故除來蘇外應用者較少.酚（石炭酸）（carbolic acid）：無色結(jié)晶，有特殊臭味，受潮呈粉紅色，但消毒力不減.為細胞原漿毒，對細菌繁殖型1:80~1:110溶液，20℃30分鐘可殺死，但不能殺滅芽胞和抵抗力強的病毒.加肥皂可皂化脂肪，溶解蛋白質(zhì)，促進其滲透，加強消毒效應，但毒性較大，對皮膚有刺激性，具有惡臭，不能用于皮膚消毒.來蘇（煤酚皂液）（lysol）：以47.5%甲酚和鉀皂配成.紅褐色，易溶于水，有去污作用，殺菌力較石炭酚強2~5倍.常用為2~5%水溶液，可用于噴灑、擦試、浸泡容器及洗手等.細菌繁殖型10~15分鐘可殺滅，對芽胞效果較差.六氯酚（hexochlorophane）：為雙酚化合物，微溶于水，易溶于醇、酯、醚，加堿或肥皂可促進溶解，毒性和刺激性較少，但殺菌力較強.主要用于皮膚消毒.以2.5~3%六氯酚肥皂洗手可減少皮膚細菌80~90%，有報告可產(chǎn)生神經(jīng)損害，故有宜長期使用.（2）酸類 對細菌繁殖體及芽胞均有殺滅作用.但易損傷物品，故一般不用于居室消毒.5%鹽酸可消毒洗滌食具，水果，加15%食鹽于2.5%溶液可消毒皮毛及皮革，10l/kg加熱30℃浸泡40小時.乳酸常用于空氣消毒，100m3空間用10g乳酸薰蒸30分鐘，即可殺死葡萄球菌及流感病毒.（3）醇類乙醇（酒精）75%濃度可迅速殺滅細菌繁殖型，對一般病毒作用較慢，對肝炎病毒作用不肯定，對真菌孢子有一定殺滅作用，對芽胞無作用.用于皮膚消毒和體溫計浸泡消毒.因不能殺滅芽胞，故不能用于手術器械浸泡消毒.異丙醇（isopropylalcohol）對細菌殺滅能力大于2.溶解蛋白消毒劑 主要為堿性藥物，常用有氫氧化鈉、石灰等.（1）氯氧化鈉 白色結(jié)晶，易溶于水，殺菌力強，2~4%溶液能殺滅病毒及細菌繁殖型，10%溶液能殺滅結(jié)核桿菌，30%溶液能于10分鐘殺滅芽胞，因腐蝕性強，故極少使用，僅用于消滅炭疽菌芽胞.（2）石灰 遇水可產(chǎn)生高溫并溶解蛋白質(zhì)，殺滅病原體.常用10~20%石灰乳消毒排泄物，用量須2倍于排泄物，攪拌后作用4~5小時.20%石灰乳用于消毒炭疽菌污染場所，每4~6小時噴灑一次，連續(xù)2~3次.刷墻2次可殺滅結(jié)核芽胞桿菌.因性質(zhì)不穩(wěn)定，故應用時應新鮮配制.3.氧化蛋白類消毒劑 包括含氯消毒劑和過氧化物類消毒劑.因消毒力強，故目前在醫(yī)療防疫工作中應用最廣。
6.滅菌方法有哪些
1.干熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要是用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌，火焰滅菌通常用于無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過火焰數(shù)次，利用火焰對管口等進行滅菌，阻止管口污染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，均可在烤箱內(nèi)干熱滅菌。通常加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌。但不宜超過170℃，玻璃量具易變形。降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時裝入干烤箱內(nèi)的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底。
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，穿透力強，溫度高，滅菌效果最好。
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規(guī)定的溫度，必須將冷空氣完全排除。否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規(guī)定的要求，滅菌就不徹底。
3.紫外線 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制。
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關。
我國規(guī)定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過100h，則應更換。表面有塵土，降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜。
7.實驗室消毒滅菌方法
一、消毒技術 （一）明確消毒的主要對象 應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類，有針對性地使用消毒劑。
（二）采取適當?shù)南痉椒?根據(jù)消毒對象選擇簡便一、消毒技術（一）明確消毒的主要對象應具體分析引起感染的途徑、涉及的媒介物及病原微生物的種類，有針對性地使用消毒劑。（二）采取適當?shù)南痉椒ǜ鶕?jù)消毒對象選擇簡便、有效、不損壞物品、來源豐富、價格適中的消毒方法。
醫(yī)院診療器械按污染后可造成的危害程度和在人體接觸部位不同分為三類：1. 高度危險的器材穿過皮膚、粘膜而進入無菌的組織或器官內(nèi)部，或與破損的皮膚粘膜密切接觸的器材，如手術器械、注射器、心臟起搏器等。必須選用高效消毒法（滅菌）。
2. 中度危險的器材僅與皮膚、粘膜密切接觸，而不進入無菌組織內(nèi)，如內(nèi)窺鏡、體溫計、氧氣管、呼吸機及所屬器械、麻醉器械等。應選用中效消毒法，殺滅除芽胞以外的各種微生物。
3. 低度危險器材和物品不進入人體組織，不接觸粘膜，僅直接或間接地與健康無損的皮膚接觸，如果沒有足夠數(shù)量的病原微生物污染，一般并無危害，如口罩、衣被、藥杯等，應選用低效消毒法或只作一般衛(wèi)生處理。只要求去除一般細菌繁殖體和親脂病毒。
（三）控制影響消毒效果的因素 許多因素會影響消毒劑的作用，而且各種消毒劑對這些因素的敏感性差異很大。1. 微生物的種類不同類型的病原微生物對消毒劑抵抗力不同，因此，進行消毒時必須區(qū)別對待。
（1）細菌繁殖體易被消毒劑消滅，一般革藍氏陽性細菌對消毒劑較敏感，革藍氏陰性桿菌則常有較強的抵抗力。繁殖體對熱敏感，消毒方法以熱力消毒為主。
（2）細菌芽胞芽胞對消毒因子耐力最強，殺滅細菌芽胞最可靠的方法是熱力滅菌，電離輻射和環(huán)氧乙烷熏蒸法。在化學消毒劑中，戊二醛、過氧乙酸能殺滅芽胞，但可靠性不如熱力滅菌法。
（3）病毒對消毒因子的耐力因種類不同而有很大差異，親水病毒的耐力較親脂病毒強。（4）真菌對干燥、日光、紫外線以及多數(shù)化學藥物耐力較強，但不耐熱（60℃1小時殺滅）。
2. 微生物的數(shù)量污染的微生物數(shù)量越多需要消毒的時間就越長，劑量越大。3. 有機物的存在①有機物在微生物的表面形成保護層妨礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用，以致于微生物逐漸產(chǎn)生對藥物的適應性。
②有機物和消毒劑作用，形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。③一部分消毒劑與有機物發(fā)生了作用，則對微生物的作用濃度降低。
④有機物可中和一部分消毒劑。消毒劑中重金屬類、表面活化劑等受有機物影響較大，對戊二醛影響較小。
4. 溫度隨著溫度的升高，殺菌作用增強，但溫度的變化對各種消毒劑影響不同。如甲醛、戊二醛、環(huán)氧乙烷的濕度升高1倍時，殺菌效果可增加10倍。
而酚類和酒精受溫度影響小。5. PH值從兩方面影響殺菌作用。
①對消毒劑的作用：改變其溶解度和分子結(jié)構(gòu)。②pH過高或過低對微生物的生長均有影響。
在酸性條件下，細菌表面負電荷減少，陰離子型消毒劑殺菌效果好。在堿性條件下，細菌表面負電荷增多，有利于陽離子型消毒劑發(fā)揮作用。
6. 處理劑量與監(jiān)測保證消毒、滅菌處理的劑量，加強效果監(jiān)測，防止再污染。二、滅菌技術（一）高壓蒸汽滅菌法的注意事項第一，無菌包不宜過大（小于50cm*30cm*30cm），不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。
消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。
消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。
阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。
經(jīng)高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測：有以下三種方法：第一種是工藝監(jiān)測，又稱程序監(jiān)測。
根據(jù)安裝在滅菌器上的量器（壓力表、溫度表、計時表）、圖表、指示針、報警器等，指示滅菌設備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達到滅菌要求。
此法作為常規(guī)監(jiān)測方法，每次滅菌均應進行第二種是化學指示監(jiān)測。利用化學指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點，以判斷是否達到滅菌所需參數(shù)。
8.微生物實驗室常用的滅菌方法有哪些
常用的滅菌方法主要包括以下三種：干熱滅菌；濕熱滅菌；紫外滅菌1.干熱滅菌法1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達滅菌目的，火焰滅菌通常用于無菌操作中試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等實驗物品的滅菌，防止管口污染。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌.將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，在烤箱內(nèi)加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌.但不宜超過170℃.此外降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂.干熱滅菌時裝入干烤箱內(nèi)的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底.2.濕熱滅菌法通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，溫度高，滅菌效果最好.注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣.有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多.在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規(guī)定的溫度，必須將冷空氣完全排除.否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規(guī)定的要求，滅菌就不徹底.3.紫外線 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制.紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關.紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜。.。
